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1、BIOTECHNOLOGYBULLETIN·技术与方法·2012年第1期RSAP分子标记技术在园艺植物研究中的应用任羽1王得元2黄少华1徐世松1张志群1（1中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，儋州571737；2广东省农业科学院蔬菜研究所，广州510640）摘要：限制性位点扩增多态性（RSAP）是一种基于PCR的新型植物分子标记技术，具有操作简便、结果稳定、效率较高的特点。该技术以植物基因组上广泛分布的限制性位点位为靶标，通过独特的引物设计和PCR扩增程序，无需限制性酶切环节，只要一个简单的PCR，即可产生基于植物限制性位点的多态性标记。阐述了RS
2、AP的原理与流程，对该技术的优势和应用情况做了总结，并对其前景进行了展望。关键词：园艺植物限制性位点扩增多态性（RSAP）分子标记RSAPMolecularMarkerTechniqueandItsApplicationofHorticulturePlants12111RenYuWangDeyuanHuangShaohuaXuShisongZhangZhiqun（1TropicalCropsGeneticResourcesInstitute,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences,Danzhou57173
3、7；2VegetableInstitute,GuangdongAcademyofAgriculturalSciences,Guangzhou510640）Abstract:Restrictionsiteamplifiedpolymorphism（RSAP）,anovelPCR-basedplantmarkertechnique,featureseasy,reliability,andefficientcharacteristic.Targetedtorestrictionsitesdispersedamongplantgenomes,RSAPadopte
4、duniqueprimerdesignandPCRproceduretogeneratepolymorphicmarkersatrestrictionsites,withoutrestrictedenzymedigesting.ThispaperdescribesdtheprincipleandprotocolofRSAP,analysestheadvantageandtheapplicationofRSAPmarkertechnique,anddiscussestheprospectofthistechnique.Keywords:Horticultu
5、rePlantsRestrictionsiteamplifiedpolymorphism（RSAP）MolecularmarkerDNA标记以其数量多、多态性高、可直接反映生物基因组多态性等优点，目前已被广泛应用于遗传多样性分析、连锁图谱构建、重要性状基因标记及标记辅助选择等方面，在植物遗传育种和基因组研究中发挥着越来越重要的作用。通过锚定生物基因组中不同种类的位点或序列，采用一定的检测手段，目前已发展出了多种DNA标记技术。如限制性片段长度多态性（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）［1］、扩增片段长度
6、多态性（amplifiedfragmentlengthpolymorphism,AFLP）［2］、切割AFLP（cleavedAFLP，cAFLP）［3］等锚定的是基因组上的限制性位点，分别采用特定的方法检测这些位点上存在的多态性；简单重复序列多态性（simplesequencerepeat，SSR）锚定的则是基因组上的简单重复序列，检测其因重复次数不同产生的多态性［4］；相关序列扩增多态性（sequence-relatedamplifiedpolymorphism，SRAP）［5］、目标区域扩增多态性（targetregionamplifiedpoly
7、morphism，TRAP）［6］锚定的是基因编码区，因启动子或内含子差异产生的多态性标记；反转录转座子间扩增多态性（inter-retrotransposonamplifiedpolymorphism，IRAP）则锚定反转录转座子，通过PCR扩增检测它们之间DNA片段长度多态性［7］。限制性内切酶识别位点（简称限制性位点）在生物基因组上分布广泛。基于限制性位点，科学家们首先创建了RFLP标记，该标记技术采用克隆的收稿日期:2011-07-12基金项目:国家科技支撑计划项目（2007BAD45B06）,海南省自然科学基金项目（30824）,中央级公益性科
8、研院所基本科研业务费专项（2011PZS067）,广东省自然科学基金项目（000
