产志贺毒素大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶基因型的研究_论文

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1、产志贺毒素大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶基因型的研究【摘要】目的探讨产志贺毒素大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶(extendedspectrumβlactamases，ESBLs)类型及耐药机制。方法采用纸片琼脂扩散法筛选36株产志贺毒素大肠埃希菌产ESBLs菌株，接合传递实验、质粒谱分析、PCR检测耐药基因和DNA序列分析产ESBLs菌株的表型和基因型。结果双纸片扩散法证明有2株产志贺毒素大肠埃希菌产ESBLs，美国株5nonO157:H7和中国株27O157:H7对头孢他啶等第三、第四代头孢菌素和氨基糖苷类抗生素耐药，并能通过的质粒传递给受体菌。PCR检测含

2、有blaTEM基因。DNA同源分析表明861bp的blaTEMDNA片段与blaTEMIDNA片段同源。结论产志贺毒素大肠埃希菌美国株和中国株产生相同类型的ESBLs，表现出对第三、第四代β内酰胺酶类抗生素耐药。【关键词】产志贺毒素大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶基因型StudyonthegenotypeofextendedspectrumbetalactamasesamongABSTRACTObjectiveToinvestigatethegenotypeandantimicrobialmechanismofextendedspectrum11/11beta

3、lactamasesamongShigatoxinproducing(STEC).MethodsAntibioticsusceptibilitywastestedbythediskdiffusiontoscreenoutthestrainsthatproducedtheESBLs;conjugativetransfertest,plasmidprofile,PCRandDNAsequencingwereusedtodetectthephenotypeorgenotypeofSTEC.ResultsOf36samples,theretwoisolatespro

4、ducingESBL,5nonO157:H7fromAmericanand27O157:H7fromChina,andtheybothwereresistanttoaminoglycosidesandthethirdgenerationcephalosporinssuchasceftazidime.DoubledisktestshowedthattheyproducedESBLandtheresistantphenotypeweretransferredtotherecipientbyaconjugativeplasmidofTEMβlactamasesen

5、codinggenewasidentifiedbyPCRandthe861bpfragmentofblaTEMDNAhadahighhomologywiththatofblaTEM1.ConclusionsSTECisolatesfromAmericaandChinacarrythesamegenotypeESBLs,whichmaybethemajorresistancemechanismagainstthethirdandfourthgenerationcephalosporins.KEYWORDSShigatoxinproducing(STEC);11

6、/11Extendedspectrumβlactamases(ESBL);Genotype产志贺毒素大肠埃希菌(Shigatoxinproducing，STEC)有110种血清型，主要血清型O157：H7可引起出血性结肠炎(hemorrhagiccolitis，HC)和溶血性尿毒综合症(hemolyticuremicsyndrome，HUS)。牛羊等动物是其天然宿主，抗菌药物作为动物生长促生长剂，造成动物肠道细菌多重耐药，同时STEC感染的临床患者在应用广谱抗生素进行治疗时，可导致STEC多药耐药菌株的增加［1］。ESBLs主要由革兰阴性菌产生，通过质粒介导

7、，对包括第一、第二和第三代头孢菌素以及氨曲南在内的β内酰胺酶类广谱抗生素具有水解作用［2］。ESBLs的种类超过200余种，最常见的是TEM和SHV型衍生的β内酰胺酶，还包括PER型酶、CTX型酶及VEB1等型酶［3］。ESBLs编码基因具有可转移性，随质粒在同种或不同种细菌间传播，导致耐药基因快速传播。国内、外不同地区肠杆菌科分离株所产生ESBLs的类型不一，以TEM型和SHV型多见，而STEC产ESBLs菌株流行情况国内、外均未见报道。本文应用细菌学与分子生物学方法研究STEC菌株ESBLs的表型及基因型，探讨STEC产ESBLs的基因类型及耐药机制。

8、1材料与方法菌株来源11