大肠埃希菌产per1型超广谱β内酰胺酶的研究论文

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1、大肠埃希菌产PER1型超广谱β内酰胺酶的研究论文【摘要】目的检测大肠埃希菌产PER1型超广谱β内酰胺酶的发生率及其耐药特点。方法采用双纸片增效确证试验进行超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的表型检测，对表型阳性菌株用聚合酶链反应(PCR)和PCR产物测序方法确定超广谱β内酰胺酶的基因型。结果167株大肠埃希菌中有50株产ESBLs，占29.9%(50/167)；6株产PER1型ESBLs，占3.6%(6/167)。6株产PER1型ESBLs大肠埃希菌均对头孢他啶和头孢噻肟耐药，5株对头孢西丁耐药，4株对阿米卡星敏感，全部菌株对亚胺培南敏感。结论大肠埃希菌中检测到产PER

2、1型超广谱β内酰胺酶，且其耐药和多重耐药性严重.freelβlactamaseproducedABSTRACTObjectiveToinvestigatetheprevalenceofPER1typeextendedspectrumβlactamases(ESBLs)anditsantimicrobialresistanceprofileinEscherichiacoli.MethodsOnehundredandsixtysevenstrainsofEscherichiacoliallkindsofclinicalspecimensfromfourhospitalsofN

3、anchangcityfromAugust2002toJune2003.Antimicrobialsusceptibilitytests(AST)inedbyKirbyBauerdiskdiffusiontest.DoubledisktestandthreedimensionextractiontestineESBLs.blaPER1genesplifiedbyPCR.TheproductsofPCRasegenotype.ResultsThepositiveratesofESBLsinEscherichiacoliong6isolatescarringblaPER1,al

4、leandceftaxidime,2resistanttoamikacin,5resistanttocefoxitinandallsensitivetoimipenem.ConclusionPER1βlactamasesandtheirencalinggenesaredetectedinEscherichiacoli.TheisolatesharbouringblaPER1areresistanttomanyantibiotics.KEYP)、头孢吡肟(CPE)、头孢西丁(CFX)、头孢噻肟(CTX)、头孢噻肟/克拉维酸(CTX/CA)、头孢他啶(CAZ)、头孢他啶/克拉维酸(

5、CAZ/CA)(购自Oxoid公司)；氨苄西林(ABPC)、阿奇霉素(AZM)、环丙沙星(CPLX)、克林霉素(CLDM)、氨曲南(AZ)、呋喃妥因(NFT)、阿米卡星(AMK)购自北京天坛药物生物技术开发公司。(3)PCR引物由上海博亚生物公司合成，序列如下：blaTEMA：5′GAGTATTCAACATTTCCGTGTC3′blaTEMB：5′TAATCAGAGAGTGAGGCACCTATCTC3′blaSHVA：5′TGGTTATGCGTTATATTCGCC3′blaSHVB：5′GCTTAGCGTTGCCAGTGCT3′blaPER1A：5′AATTTG

6、GGCTTAGGCTTAGGGCAGAA3′blaPER1B：5′ATGAATGTCATTATAAAAGC3′blaVEB1A：5′CGACTTCCATTTCCCGATGC3′blaVEB1B：5′GGACTCTGCAACAAATACGC3′(4)主要仪器Vitek32全自动微生物分析仪(法国BioMerieux公司)、PCR扩增仪(美国PE公司)、双向电泳分析仪(美国BioRad公司)、Tanon凝胶成像系统(上海天能公司)。1.2方法(1)菌株鉴定及药敏试验所有菌株分别由各单位的全自动微生物分析仪进行鉴定，接种至半固体培养基，-20℃保存。药敏试验由本

7、室采用纸片扩散法集中测定，严格按照美国国家临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)的标准判断结果，质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922。(2)ESBLs表型确证试验分别将头孢噻肟(CTX)、头孢噻肟/克拉维酸(CTX/CA)、头孢他啶(CAZ)、头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CA)药敏纸片贴于涂有被测菌的MH平板上，35℃孵育16～18h观察结果，若CAZ/CA比CAZ或CTX/CA比CTX的抑菌环大于或等于5mm以上即为ESBLs阳性，确证试验符合