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1、光诱导cfos基因在不同日龄母鸡中脑和间脑的表达河北农业大学硕士学位论文光诱导c-fos基因在不同日龄母鸡中脑和间脑的表达姓名:程金金申请学位级别:硕士专业:基础兽医学指导教师:胡满2009-06-15摘要c-fos基因是即早基因家族中最重要成员之一,普遍存在于中枢神经细胞中,正常情况下表达水平很低,难以检测,多种刺激因素可诱导该基因迅速的一过性表达,由此可以描绘出一个参与该信息传递过程的中枢通路,并可获得脑部相应功能活动数据。本研究用c-fos法研究了不同日龄母鸡脑部对光照刺激的反应,对14、60、120180和300日龄母鸡右眼遮
2、光7d后接受20lx的光照刺激1.5h,暗适应1.5h后灌流固定,取脑制作石蜡切片,采用免疫组化方法检测c-fos基因在中脑和间脑的表达。同时采用Westernblot技术检测Fos蛋白的存在。根据c-fos基因表达出现的方式、部位和数量,分析鸡脑参与光信息传递过程的中枢通路,为进一步闸明鸟类视觉形成机理提供有价值的资料;由Fos蛋白在不同日龄母鸡表达的不同,判断不同日龄母鸡脑对光线刺激引起的反应,探究光照对母鸡生产性能的影响机制,为养鸡业科学利用光照提供理论依据。同时应用免疫组化方法检测了促性腺激素释放激素GnRH免疫反应阳性神经元
3、在中脑和间脑的分布,通过其与c-fos基因表达产物在神经元内的关系,探讨母鸡脑内光照刺激与生殖活动间内在联系。结果显示,不同日龄母鸡c-fos基因在视顶盖中央灰质层SGC,圆核ROT,外侧膝状腹侧核Glv,峡核大细胞部Imc,狭核小细胞部Ipc,室旁核PVN,弓状核ARC均有表达,阳性细胞主要出现在脑左侧,阳性细胞计数与对照组相比较差异显著p0.010;不同日龄母鸡c-fos基因在SGC,ROT,Glv,Imc,Ipc的表达不同,14,60日龄表达较对照组明显增加,120,180日龄保持较高水平,300日龄明显下降;不同日龄母鸡c-f
4、os基因在PVN,ARC的表达不同,120,180日龄c-fos基因表达强度最大,14,60日龄次之,300日龄最低;GnRH在中央灰质层SGC,圆核ROT,室旁核PVN,弓状核ARC均有表达。表明鸡的离顶盖通路不仅是视觉信息加工的主要通路,而且对光照刺激的反应亦较敏感;离顶盖通路的一个侧支顶盖?峡核回路也参与光信息的传递与加工;不同日龄母鸡对光照有不同的反应;光照刺激可能通过影响光信息通路中神经核团的GnRH分泌与含量对母鸡生殖功能起调节作用。关键词:间脑;中脑;光刺激;c-fos基因;不同日龄母鸡;促性腺激素释放激素GnRHThe
5、expressionofc-fosgeneinducedbylightstimulationinhenmesencephalonanddiencephalonsatdifferentday-ageGraduateStudent:ChengJinjinMajor:BasalVeterinaryMedicineAdvisor:Prof.HuManAbstractAproto-oncogene,c-fos,isoneofthemostextensivelyinvestigatedimmediateearlygenes.Theexpressi
6、onproductofc-foshasbeenviewedasacellularmarkerofneuralactivitytoidentifyactivatedneuronsinthecentralnervoussystemCNSManystructuresintheCNS;expressedc-fosproteininresponsetovariousformsofstimulationAccordancetotheresponses,apathwaytothestimulationintheCNScanbeoutlined.Th
7、eresponseofbrainhenatdifferentday-agetolightstimulationwerestudiedbyc-fosmethodinthisstudy.Afterwearingablinderfor7days,therighteyesreceivedalightstimulationof20Luxfor1.5h.and1.5hdarkadaptation.Thenthebrainswereremovedfromtheskullsafterperfusion.Serialparaffinsectionswe
8、remadeandunderwentaimmunohistochemistricstainingforFosproteintotesttheexpressionofc-fosgeneinducedbylightstimu
