食用菌学-9食用菌实验

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1、食用菌学实验教学大纲 『教学大纲』『加入时间』2008/5/2216:58:40　　　『点击次数』529实验课编号：课程属性：选修实验属性：非独立课程学时学分：总学时：40总学分：2实验学时：20实验课应开学期：秋季理论课开课后第三周安排每周4学时先修课程：植物学、园艺原理与技术、遗传学、植物生理学一、课程的性质和任务食用菌学是一门应用学科，因此，在教学实验和实践中，首先要求培养学生的实践技能。同时，作为一个大学本科生，不仅要学会如何栽培食用菌，而且应当理解某些技术步骤和技术程序中的具体措施或组合栽

2、培的原理，使感性认识提高到理性认识的水平。这样的毕业生就能在生产实践中，具备较多的自由权，具有更高的独立思考能力和技术革新的能力。本课程是食用菌的理论教学同步开设的必不可少的教学环节，通过本实验课的开始，使学生了解食用菌的类型，掌握食用菌的基本内容和方法。二、实验目的与基本要求实验目的：通过本实验的开展，应使学生掌握以下知识点，并培养以下能力：1．了解掌握食用菌制种的生产工艺流程和制作各级菌种的基本技能。2．了解不同温度和营养条件下对平菇、木耳、金针菇等菌丝生长的影响。3、了解食用菌采后处理的基本知

3、识。实验要求：要求教师结合理论课教学要求，调查食用菌生产加工情况，观察各类食用菌的特色以及如何栽培食用菌，要求学生动手操作、分组讨论，独立完成实验报告。三、实验考核方式及办法结合实验报告、课堂讨论、实验过程综合评分，采取优、良、中、及格和不及格的评分方式。四、实验项目一览表食用菌学实验项目一览表序号实验项目名称实验类型实验要求适用专业学时1母种培养基的配制与菌种分离与培养验证性必做农科类42原种与栽培种的制作验证性选做农科类43平菇与金针菇的栽培综合性必做农科类44食用菌栽培、加工现场参观综合性必做

4、农科类8五、实验项目的具体内容：实验一母种培养基的配制与菌种分离与培养实验1、本次实验的目的和要求学会母种培养基的配制方法，掌握母种转管继代培养技术，了解食用菌母种制作的工艺流程和制作母种的基本技能。2、实验内容或原理（1）母种培养基配制。工艺流程：培养基配方培养基的配制分装试管理灭菌摆斜面（2）菌种分离与培养（本实验以组织分离为例）工艺流程：种菇的选择与消毒组织块的切取菌丝培养3、需用的仪器或试剂等仪器：接种箱或超净工作台、高压灭菌锅、电炉、天平、试管、试管架、解剖刀、漏斗、漏斗架、橡皮管、玻璃管

5、、止水、牛角勺、棉花、纱布、酒精灯。试剂：75%酒精、高锰酸钾、富尔马林、马铃薯、葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B、木屑、麸皮、石膏粉等。4、实验步骤（1）母种培养基配制a、培养基配方以PDA培养基为例，马铃薯（去皮）200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。为经强化营养或准备保藏菌种，可添加KH2PO43g、MgSO4.7H2O1.5g、VB110mg。b、培养基配制首先将马铃薯去皮、洗净、挖去芽眼、切成薄片，称取200g，放入铝锅中用1000ml清水加热煮沸，维持20min左

6、右，煮至软而不烂为止。用双层湿沙布过滤，然后取滤液并补足蒸发损失的水分。再加入琼脂继续加热泪，待琼脂溶化后，添加葡萄糖及其它成分，搅拌均匀后准备装管。C、分装试管培养基配制后应趁热分装。装管时勿使管内外壁沾上溶液，以免浸湿棉塞，污染杂菌。装管后塞上棉塞。棉塞的大小、松紧度应适宜，以用手提棉塞、试管不脱落为准。然后每10支度试管扎成一捆，棉塞上方用牛皮纸包好，避免灭菌时被水蒸汽浸湿。D、灭菌灭菌前将水加至锅内水位标记高度。将试管放入锅内，盖上锅盖，对角旋紧锅上螺旋，并闭排气阀，开始加热,当锅内蒸汽大量

7、排出时再继续排汽3-5min,关闭放气阀.当压力表指针指到0.15Kg/cm2时(灭菌所需压强)开始计时,继续维持该压强30min。灭菌结束持压力表指针自然回到”0”位时打开放汽阀,排出锅内剩余蒸汽后,打开锅盖.注意切忌在压力表未到”0”位时就放汽,以免试管内的培养基向上冲浸湿棉塞,造成以后菌种的污染.E、摆斜面当培养基的温度降到60℃时，将试管斜面放在木棒上，使呈斜面，斜面的长度以占试管长度的1/2为宜。冷却后即成斜面培养基。(2)菌种的分离与培养（本实验以组织分离为例）种菇的选择与消毒选择出菇早

8、，菇形正，菇盖肥厚，具有该品种特征，无病虫害、无杂菌污染，子实体八九分成熟的作为种菇。种菇选定后，用75%酒精进行表面消毒。组织块的切取将斜面培养基放进接种室、接种箱或超净工作台内，用紫外灯（或化学药品）进行消毒0.5h以上,关闭紫外灯后20min后,再开始进入接种室内进行接种。接种是一项技术性很强的工作，需要在无菌的环境中以无菌操作方法进行接种，才能减少污染。无菌操作是接种过程中最基本的操作方法，要求操作熟练，动作迅速。用无菌刀在菇柄或菇盖中部纵切一刀，然后用手将菇