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1、双孢蘑菇菌种要求（网载）栽培双孢蘑菇使用的菌种是人工培育的纯菌丝体及其培养基的混合体。我国采用三级扩大繁育程序（即母种、原种、栽培种）培育双孢蘑菇菌种。1范围双孢蘑菇（Agaricusbisporus）菌种的质量要求、试验方法、检验规则及标签、标志、包装、贮运等。本标准适用于双孢蘑菇（Agaricusbisporus）的生产、流通和使用。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。在本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB
2、191－1990包装储运图示标准 GB4789.28－1994 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂GB9687－1988食品包装用聚乙烯成型品卫生标准GB9688－1988食品包装用聚丙烯成型品卫生标准GB/T12728－1991 食用菌术语3定义本标准采用下列定义。3.1母种 stockculture经各种方法分离、选育或杂交得到的具有出菇能力的菌丝体纯培养物及其继代培养物。3.2原种pre-culturespawn由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。栽培种spawn由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯
3、培养物。3.4拮抗现象antagonism具有不同遗传基因的菌落间产生不生长区带或形成不同形式线形边缘的现象。3.5无棉塑料盖plasticstop可代替塑料盖，带有某种高分子或纤维材料可满足滤菌和透气要求的塑料盖。3.6玻璃菌种瓶glassspawnbottle圆柱形，容积750mL，耐126℃高温，无色、淡绿色或淡兰色的透明玻璃瓶。瓶体总高190mm±2mm，瓶颈高25mm±1mm，瓶口外径40mm±1mm，瓶体外径82mm±1mm。3.7塑料菌种瓶polypropylenespawnbottle圆柱形，容积85
4、0mL，耐126℃高温，白色、半透明，卫生标准符合GB9688规定的塑料瓶。瓶体总高165mm±2mm，瓶颈高28mm±1mm，瓶口外径63mm±1mm，瓶体外径90mm±1mm。3.8角变sector 因菌丝体局部变异或感染病毒而导致菌丝变细、生长缓慢、菌丝体表面特征成角状异常的现象。3.9高温抑制线hightemperaturedline食用菌菌种在生长过程中受高温的不良影响，培养物出现的圈状发黄、发暗或菌丝变稀弱的现象。3.10同工酶isoenzyme催化相同生化反应，而结构及理化性质不同的酶分子。通过凝胶电
5、泳使同工酶分离成迁移率不同的区带，经生物化学染色后显示出的同工酶谱，可对生物品种进行酶分子水平的鉴别或鉴定。4质量要求4.1母种4.1.1 容器规格采用18mmX180mm、20mmX200mm的玻璃试管。4.1.2 培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA培养基），按GB4789.28中4.79规定配置。 4.1.3感官指标符合表1规定。表1项目要求棉塞或无棉塑料盖干燥、洁净、松紧适度，能满足透气和滤菌要求培养基灌入量为试管总体积的十分之一至五分之一培养基斜面长度为试管总长度的二分之一至五分之一斜面接种块大小3~5m
6、mX3~5mm培养基斜面正面外观菌丝体特征洁白或米白、浓密、羽毛状或叶脉状菌丝体表面均匀、平整、无角变菌丝分泌物无菌落边缘整齐，无膏状、蜡状细菌或酵母菌菌落及霉菌菌落培养基斜面背面外观培养基不干缩，颜色均匀、无暗斑、无色素培养物气味有双孢蘑菇菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味培养物镜检菌丝粗壮，无杂菌菌丝及孢子，无虫及虫卵。4.1.4 菌丝生长速度在适温（24℃±1℃）下，15－20天长满试管。4.1.5母种遗传和栽培性状供种单位，母种需经酯酶(Est)同工酶类型鉴定，确认其遗传类型与对照相同后，需再经出菇试验确定产
7、量及品质等栽培农艺性状合格后，方可用于扩大繁殖或出售。4.1.5.1菌丝体Est同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳类型包括G型(呈现e1,e3特征带)、H型(呈现e2,e4和e30-33特征带)、HG1~HG2型(呈现e1,e3,e30-33特征带)和HG4型(呈现e1,2,3,4和e30-33特征带)等。以Est区带向正极泳动距离与溴酚蓝指示剂向正极泳动距离的比值作为电泳相对迁移率(Rm)。e1,e2,e3,e4,e30,e31,e32和e33的Rm值分别为0.820,0.810,0.760,0.750,0.128,0.1
8、00,0.070和0.010。4.1.5.2菌丝萌发、定植能力接种到适合的培养基后，在正常条件下24小时内萌发恢复，定植迅速、菌丝健壮，20天以内长满培养基。4.1.5.3结菇转潮能力覆土后12～16天结菇，分布均匀；18～22天采菇，每潮菇间隔7～10天。4.1.5.4抗逆性对温度、湿度、酸碱度等生长条件变化耐受能力较强；对主要病虫害的抵抗能
