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1、2004年1月第28卷第1期安徽大学学报(自然科学版)JournalofAnhuiUniversityNaturalScienceEditionJanuary2004Vol.28No.1染料脱色真菌的选育及其对合成染料的脱色作用荚荣,周业亭,刘自平(安徽大学生命科学学院,安徽合肥230039)摘要:白腐担子菌F17和PM2对不同结构的多种合成染料表现出较强的脱色能力。麦芽汁培养基、温度28℃、pH4～5和菌体摇瓶培养3天后加入染料,是染料脱色的最佳条件;接种量和染料浓度对2株菌的脱色效果也有较大的影响。金属离子Mn2+、Pb2+和Fe2+的补充,可促进染料脱色,而Ag+、Cu
2、2+和Hg2+存在抑制作用。木质素降解抑制剂叠氮化钠、氰化钾和硫脲明显抑制染料的脱色。关键词:白腐菌;合成染料;脱色;条件中图分类号:Q93文献标识码:A文章编号:1000-2162(2004)01-0064-05染料是印染、纺织和造纸等工业废水中的重要污染物之一,就结构而言,可分为偶氮、蒽醌、三苯甲烷和杂环等,染料分子由于其人工合成的复杂的芳香烃结构而增加了其降解的难度。染料废水所含染料种类繁多,化学结构复杂,色度较深,水质多变,COD值高,因此脱色是染料废水处理的主要问题之一1。自然界中白腐菌是一类重要的生物资源,它们对木质素及其它毒性较大的有机污染物具有良好的降解能力,
3、包括不同结构的多种染料2,3。因白腐菌降解污染物需要的营养要求低,能耐受高污染物浓度以及对其他微生物存在较强的拮抗作用等特点,已被证实为在废水处理中很有发展前景的微生物4,5。本研究利用偶氮、蒽醌、三苯甲烷和杂环不同结构类型的多种染料为作用对象,从13株具木质素降解性能的白腐菌中选育出2株脱色能力较强的担子菌F17和PM2,研究其脱色能力及影响因素,以期在染料废水治理中得以应用。1材料和方法1.1材料1.1.1菌种来源本室分离、保存的13株木质素降解白腐菌。染料购自上海试剂三厂;偶氮类:刚果红(λmax=506nm),金橙G(λmax=1.1.2染料474nm),橙黄Ⅳ(λm
4、ax=440nm);蒽醌类:茜素红(λmax=432nm);三苯甲烷类:结晶紫(λmax=588nm);杂环类:中性红(λmax=525nm),次甲基兰(λmax=658nm),用蒸馏水配成0.5gΠL的染料溶液,加入培养液中,使其终浓度分别为25mgΠL,25mgΠL,25mgΠL,25mgΠL,10mgΠL,10mgΠL收稿日期:2003-09-05基金项目:安徽省自然科学基金资助项目(01043101);安徽省教育厅科研基金资助项目(2001KJ009)作者简介:荚荣(1964-),女,安徽芜湖人,安徽大学副教授,硕士.和5mgΠL。1.1.3培养基斜面或平板培养基(Π
5、L):葡萄糖20g,KH2PO43g,MgSO4·7H2O1.5g,VB12-10mg,200g马铃薯煮成的汁,琼脂20g,pH自然;麦芽汁培养基(gΠL):KH2PO40.5g,MgSO4·7H2O0.2g,KCL0.1g,NaNO30.1g,FeSO4·7H2O0.01g,Ca(NO3)20.05g,麦芽提取物5g,pH5-5.5;限氮培养基6(ΠL):葡萄糖10.0g,酒石酸铵0.2g,KHPO2.0g,CaCl0.1g,242MgSO4·7H2O0.5g,0.1gΠLVB110mL,1.5mmol藜芦醇,BⅠ微量元素溶液70mL,0.1mol丁二酸二甲酯(pH4.2)
6、100mL;BⅠ微量元素溶液(ΠL):MgSO4·7H2O3g,MnSO4·H2O0.5g,NaCl1.0g,FeSO4·7H2O0.1g,CoCl2·6H2O0.185g,CaCl20.08g,ZnSO4·7H2O0.18g,CuSO4·5H2O0.1g,AlK(SO4)2·12H2O0.01g,H3BO30.01g,Na2MoO4·2H2O0.012g,氨基乙酸1.5g;富氮培养基6:酒石酸铵浓度为2.0gΠL,其余与限氮培养基相同。1.2方法1.2.1染料优势脱色菌的筛选同时采用固体平板和液体摇瓶筛选法,比较13株木质素降解菌对多种染料的脱色能力。固体平板筛选是在麦芽汁
7、培养基中加入0.007%的不同染料(每种染料3个重复),再分别接入13株木质素降解菌菌丝小块于平板中心,28℃培养,肉眼观察各菌株的脱色能力和菌丝生长状况;液体测试方法如1.2.2和1.2.3。1.2.2菌体培养取斜面培养基上的菌丝接种于麦芽汁或马铃薯培养基平皿中心,28℃、培养5d,用接种铲挖取直径约6mm的菌丝小块,接种6块到装液量为50mL的摇瓶中,28℃,150rpm振荡培养。1.2.3脱色率测定菌液培养3d后,在摇瓶中分别加入不同的染料(2个重复),隔一定时间,吸取上清液,离心,测各染料的最大
