β葡萄糖苷酶产生菌的分离鉴定及酶学性质分析.doc

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1、学科分类号:081801本科学生毕业论文题目（中文）：β-葡萄糖苷酶产生菌的分离鉴定及酶学性质分析（英文）：Isolationandidentificationofβ-glycosidase-producingstrainandresearchontheenzymaticcharacteristics姓名学号200907002134院（系）生命科学与化学工程系专业、年级生物工程专业2009级指导教师2013年05月10日目录摘要IAbstractII第1章绪论11.1β-葡萄糖苷酶介绍11.2β-葡萄糖苷酶

2、的酶族分类11.3产β-葡萄糖苷酶的分布来源11.4β-葡萄糖苷酶的理化性质21.5β-葡萄糖苷酶的应用及前景展望21.6国内外有关本选题的研究动态21.7本选题的意义3第2章材料与方法42.1材料、仪器与试剂42.1.1材料42.1.2实验仪器42.1.3试剂及药品42.2实验方法42.2.1实验步骤42.2.2菌种鉴定52.3酶学性质实验62.3.1酶的最适反应pH62.3.2酶的最适反应温度62.3.3金属离子对酶活的影响6第3章结果与讨论73.1β-葡萄糖苷酶产生菌的初筛73.2β-葡萄糖苷酶产生菌

3、的复筛和酶活测定73.2.1复筛73.2.2β-葡萄糖苷酶酶活测定73.3菌种鉴定83.3.1显微形态观察83.3.2菌落形态观察83.3.3生理生化实验93.3.4革兰氏染色反应93.4酶学性质的研究93.4.1β-葡萄糖苷酶的最适pH93.4.2β-葡萄糖苷酶的最适温度103.4.3金属离子对酶活的影响11第4章结论与讨论134.1讨论134.2结论14参考文献15致谢17β-葡萄糖苷酶产生菌的分离鉴定及酶学性质分析摘要β-葡萄糖苷酶(EC.3.2.1.21)又称纤维二糖酶,它属于纤维素酶类，是纤维素分

4、解酶系中的重要组成成分。本实验的目的是分离获得β-葡萄糖苷酶高产菌株，确定该菌类的分类地位，并对其所产的β-葡萄糖苷酶的酶学性质进行初步研究。本实验是采用七叶灵显色法从土壤样品中筛选β-葡萄糖苷酶产生菌,再用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)显色法进行复筛；通过形态特征、生理生化特征等方法确定其分类学地位；以PNPG为底物,测定β-葡萄糖苷酶的最适反应pH及最适反应温度。实验发现从土壤样品中筛选出的高产菌株ZF-6C，初步鉴定为Bacilluskorlensis。芽孢杆菌中ZF-6C，最适反应pH

5、和温度分别为7.0和40℃；金属离子Ca2+、Pb+增加酶活，而Cu2+、Fe2+抑制酶活。从芽孢杆菌中分离得到β-葡萄糖苷酶，芽孢杆菌ZF-6C所产β-葡萄糖苷酶从最适合的反应条件pH和温度方面，分析可能为一有高催化效率β-葡萄糖苷酶。【关键词】β-葡萄糖苷酶；分离鉴定；芽孢杆菌；酶学性质ⅠIsolationandidentificationofβ-glycosidase-producingstrainandresearchontheenzymaticcharacteristicsAbstractBeta

6、-glycosidaseenzymes(EC.3.2.1.21)alsocalledcellobiase,itbelongstothecelluloseenzyme,istheimportantcomponentofcellulolyticenzymes.Thediscretionoftheenzymeactivitydirectlyaffecttheoverallofcelluloseenzymeactivity.Thepurposeofthisexperimentisseparationofbeta-g

7、lycosidase-productionstrainsfromsoil,toclarifythetaxonomicstatus,andtostudytheenzymaticcharacteristicsoftheβ-glycosidaseAβ-glycosidase-producingstrainwasisolatedfromsoilsampleusingesculinand4-nitrophenyl-β-D-glycopyranoside(PNPG)colorationmethods;thetaxono

8、micstatusofstrainZF-6Cwasclarifiedbymorphological,physiological,chemotaxonomiccharacteristics;withPNPGasthesubstrate,theoptimalreactionpHandtemperatureofβ-glycosidaseweredetermined.Astrain,whichproducedβ-glyc