凝结多糖成分分析的实验方案

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1、凝结多糖成分分析的实验方案一、粗脂肪含量的测定1.实验材料、主要仪器与主要试剂①实验材料凝结多糖②主要仪器索氏脂肪抽提器、干燥器（直径15~18cm，盛变色硅胶）、不锈钢镊子、培养皿、分析天平（感量0.001kg）、称量瓶、恒温水浴锅、烘箱、样品筛（60目）、中数滤纸③主要试剂无水乙醚或低沸点石油醚（A.R.）2.实验步骤①滤纸预处理将滤纸切成8cm×8cm，叠成一边不封口的纸包，编号放入培养皿中。然后将盛有滤纸包的培养皿移入（105±2）℃烘箱中干燥2h，取出放入干燥器中，冷却至室温。按顺序将各滤纸包放入同一称量瓶中称重（记作a）。

2、②包装和干燥在上述已称重的滤纸包中装入3g左右研细的样品，封好包口，放入（105±2）℃烘箱中干燥3h，取出放入干燥器中，冷却至室温。按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作b）。③抽提将装有样品的滤纸包有长镊子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的1.67倍的无水乙醚，使样品包完全浸没在乙醚中。连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温在70~80℃之间，使冷凝下滴的乙醚成连珠状（120~150滴/min或回流7次/h以上），抽提至抽提筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约6~12h）。抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通

3、风处使乙醚挥发，抽提瓶中乙醚另行回收。④称重待乙醚挥发后，将滤纸包置于（105±2）℃烘箱中干燥2h，放入干燥器冷却至恒重为止（记作c）。3数据处理粗脂肪含量（%）=（b－c）/(b－a)式中a——称量瓶加滤纸包的质量，g；b——称量瓶加滤纸包和烘干样的质量，g；c——称量瓶加滤纸包和抽提后干残渣的质量，g；二、总灰分含量的测定1.主要仪器高温电炉、坩埚钳、带盖坩埚（石英坩埚或瓷坩埚）、分析天平、干燥器2.实验步骤①坩埚的准备将坩埚用体积分数为20%盐酸煮1~2h，洗净晾干后，用三氯化铁与蓝墨水的混合液在坩埚外壁及盖上写上编号。置于马

4、福炉中，在（550±25）℃下灼烧0.5h，冷至200℃以下后，取出。放入干燥器中冷却至室温，准确称量，并反复灼烧至恒重（两次称量之差不超过0.5mg）。②样品的预处理a样品的取样量以灰分10~100mg来决定试样的取样量。通常取凝结多糖1~2g即可。b样品的处理凝结多糖水分含量少的固体样品，先粉碎均匀，再取适量样品于已知质量的坩埚中进行炭化。③样品的炭化试样经上述预处理后，以小火加热试样充分炭化至无烟。④样品的灰化炭化后的试样置马福炉中，在（550±25）℃下灼烧4h。冷至200℃以下后取出，放入干燥器中冷却30min。在称量前如灼

5、烧残渣有炭粒时，应向试样中滴入少许水湿润，使结块松散，蒸出水分再次灼烧直至无炭粒即灰化完全，冷至200℃以下，取出放入干燥器中冷却30min，准确称量。反复灼烧至前后两次称量相差不超过0.5mg即为恒重。3数据处理①数据记录数据记录表空坩埚质量样品和坩埚质量残灰和坩埚质量（m3）/g（m1）/g（m2）/g12恒重②计算X=(m3-m1)/(m2-m1)式中X——样品总灰分的含量；m1——空坩埚的质量，g;m2——样品和坩埚的质量，g;m3——残灰和坩埚的质量，g。三、还原糖含量的测定方法：直接滴定法1.目的与要求①了解和掌握直接滴定

6、法测定还原糖的原理。②通过实验测定凝结多糖中还原糖的含量。2.原理将等量的碱性酒石酸铜甲液、乙液混合时，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠络合物。此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原糖还原为一价的氢氧化铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈淡黄色而指示滴定终点。根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖的含量。3.仪器与试剂①试剂a.盐酸b.碱性酒石酸

7、铜甲液称取15g硫酸铜及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000ml。c.碱性酒石酸铜乙液称取50g酒石酸钾钠、75g氢氧化钠。溶于水中。再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml,储存于橡胶塞玻璃瓶中。d.乙酸锌溶液称取21.9乙酸锌，加3ml冰醋酸，加水溶解并稀释至100ml.e.葡萄糖标准溶液准确称取1.0000g至（96±2）℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液葡萄糖浓度为1.0mg/ml。②仪器a.定糖滴定装置（150ml锥形瓶，匹配的胶塞，25ml酸式滴定管）。

8、b.电炉，500w4.实验步骤①样品处理称取2g凝聚多糖加水溶解并定容至250ml,摇匀后备用。②标定碱性酒石酸铜溶液于150ml锥形瓶中吸取碱性酒石酸甲液及乙液各5.0ml，加10ml水和玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9m