细胞工程-动物细胞培养基本技术与原理

《细胞工程-动物细胞培养基本技术与原理》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第二章动物细胞培养基本技术与原理细胞与组织培养（体外培养）(cellandtissueculture)：从机体中取出组织或细胞，模拟体内生理条件在体外进行培养，使之生存和生长。包括三个层面：器官培养、组织培养、细胞培养分别代表细胞水平、组织水平或器官水平的培养动物细胞培养的主要领域及意义动物细胞的培养特性动物细胞培养的生存条件主要讲3方面问题：一、动物细胞培养的主要领域及意义单克隆抗体与现代医学动物胚胎孵育与畜牧业动物细胞培养与现代医药业动物克隆的广泛应用1.单克隆抗体技术与现代医学单克隆抗体技术步骤：*骨髓瘤细胞(myelomacell)特定抗原免疫刺激的B淋巴细胞(antigenstim

2、ulatedBlymphoblast)融合杂交瘤细胞(hybridomacell)。杂交瘤细胞的特性：*既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术(hybridomatechnology)。单克隆抗体的特性：*具有高度的特异性、灵敏性与准确性应用：临床医学的疾病诊断。生产各种免疫疫苗。用于某些肿瘤的治疗。用于各种基础医学研究。2.胚胎孵育与畜牧业农畜动物胚胎移植：利用胚胎技术大批量生产优质胚胎，从而可以降低胚胎成本，扩大移植胚的来源。体外受精：加快农畜良种化。利用体外受精技术进行核移植、性别控制和基因导入，工厂化生产遗传性状稳定、

3、生产性能优良的家畜。类型动物细胞培养的产物人疫苗小儿麻痹症、狂犬、风疹、脑炎、乙肝表面抗原、疱疹、某些癌症动物疫苗口蹄疫、鸡瘟病、猪霍乱、马脑炎、牛痢疾、犬瘟、草鱼出血病酶尿激酶、细胞色素P450、胃蛋白酶、胰蛋白酶、纤维蛋白溶酶原激活剂、胶原酶、酪氨酸脱羧酶激素促红细胞生成素、促间质细胞激素、绒毛膜促性腺激素、促黄体激素、促滤泡激素、生长激素免疫调节因子白细胞活化因子、转移抑制因子、胸腺素、白细胞介素、干扰素、血清胸腺因子、巨噬细胞毒力因子、β-细胞生长因子3.动物细胞规模化培养与现代医药治疗性抗体抗体药物4.动物克隆技术有益应用动物克隆技术的应用前景：（1）保存优良的动物品种（2）拯救濒

4、临灭绝的珍惜动物（3）利用克隆动物工厂生产蛋白质药物（4）利用克隆技术生产人体器官二、动物细胞特性动物细胞在活体内的特性培养条件下动物细胞生长特性培养条件下动物细胞生理特性1.动物细胞在活体内的特性在活体内，动物细胞:分化的动物细胞在功能上具有明确的分工，并具有明显的形态学特征。如肌肉细胞为纺锤形，以便于行使收缩伸展功能；神经细胞具有很长的分支，很多的纤维，以便接受和传递刺激；红细胞呈园盘状，有利于和周围环境交换气体和在血管内流动；上皮细胞由于它要覆盖于表面，常常相互挤压成不规则形状。增殖分化活体内的动物细胞按照分裂能力可以分为三大类：第一类是能保持继续分裂能力的细胞，可以继续不断地分裂，如

5、骨髓干细胞、各类前体细胞；第二类细胞群是永久失去分裂能力的细胞，如各类高度特化的细胞；第三类是静止细胞群，即所谓的G0细胞，在正常情况下，它们不分裂，也不合成DNA，但在受到刺激后，则重新进入细胞分裂。如人的肝脏细胞等。第一类和第三类细胞在适当条件下可进行离体培养。2.培养条件下动物细胞的生长特性离体培养的动物细胞可分为：贴壁依赖型(anchorage-dependent)非贴壁依赖型(anchorage-independent)兼性贴壁细胞1）贴壁依赖型简称为贴壁细胞，包括成纤维细胞型、上皮细胞型、游走细胞型、多形性细胞型。成纤维细胞型细胞形态与体内成纤维细胞形态相似，胞内呈梭形或不规则三

6、角形，中央有园形核，胞质向外伸出2～3个长短不同的突起。细胞群常连接成网，生长时呈放射状或火焰状。除真正的成纤维细胞外，心肌、平滑肌、成骨细胞培养时均属这一类型。游走细胞型在支持物上分散生长，不连接成片，细胞胞质常伸出伪足或突起，呈活跃的游走和变形运动，速度快而方向不规则。在一定条件下，可转变为成纤维细胞型。多形性细胞型某些组织和细胞，如神经细胞，难以确定它们的稳定形态，可统归于多形细胞型。nervecell2）非贴壁依赖型也称悬浮型，这类细胞培养时不贴附于支持物上，可在培养液中悬浮生长。来源于血液、淋巴组织的细胞，许多肿瘤细胞等均属于此类，细胞一般呈圆形。3）兼性贴壁细胞动物细胞培养中，有

7、些细胞呈现双重性，既可以贴壁生长，也可以悬浮培养，如中国地鼠卵巢细胞、小鼠L929细胞等。4.培养条件下动物细胞的生理特点1）动物细胞的分裂周期长动物细胞分裂周期一般为12～48小时，它不仅随细胞种属的不同而有差异，即使是同一种属，不同部位的细胞所需的时间也不同。此外，培养条件如温度、pH、培养基的成分等，也会影响分裂周期的长短。2）接触抑制(contactinhibition)现象除少数悬浮培养细胞外，大多