高活性光合细菌的分离纯化培养及水处理应用研究

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1、高活性光合细菌的分离纯化培养及水处理应用研究摘要：本研究从水处理基地废液中分离纯化到6株活性较强的光合细菌，并应用到生活污水处理实验中，结果表明：在同化氨氮方面，J001号菌效果最佳，J002号菌次之；在同化总磷方面，J001号菌效果最佳，J004号菌次之。关键词：光合细菌；分离纯化；脱氮除磷StudyonIsolationandPurificationCultureandApplicationofPhotosyntheticbacteriainWaterTreatmentAbstract：Inthispaper，6strainswithstrong

2、activityofphotosyntheticbacteriawereisolatedfromthewastewaterinsewagetreatmentbase，andappliedtosewagetreatmentexperiment.Theresultsshowedthat:No.J001strainhasthebestefficiencyindegradingthenitrogen，No.J002strainfollowed;No.J001strainhasthebestefficiencyinde-gradingthephosphorus

3、，No.J004strainfollowed.Keywords：Photosyntheticbacteria；separationandpurification；assimilationofnitrogenandphosphorusdoi：10.3969/j.issn.1674-506X.2013.02-005光合细菌是地球上最早出现的具有原始光能合成体系的原核生物，能充分以光能和各种有机物为营养源进行繁殖［1］。它广泛分布在海洋、湖泊、江河、水田、土壤、污泥等各个角落，一般呈球型、卵形、弧形、杆形、环形、螺旋形、半环形、丝形［2］。大量实践研究结果

4、表明，光合细菌的降解活性不受污水中氧浓度的限制，能大量分解吸收氨、氮和硫化氢等有害物质［3］；除此之外，光合细菌在处理有机废水方面还具有占地少、投资小、能耗低、设备简单、可直接处理高浓度有机废水、不造成二次污染、不存在污泥处置难题等优点［4］，因此，高活性光合细菌在水处理方面的研究一直是各大高校、科研院所以及环保企业的研究热点［5］。本研究采用双层平板分离法从水处理基地废液中分离筛选出高活性的光合细菌，富集培养后进行水处理应用试验，对光合细菌处理城市生活污水进行脱氮除磷的处理技术具有一定的理论意义和实用价值。1材料与方法1.1材料1.1.1仪器设备收

5、稿日期：2013-04-03基金项目：四川省食品发酵工业研究设计院院立项目“微生物发酵合成高分子材料γ-PGA作为绿色环保絮凝剂的应用研究”。作者简介：邓红梅（1989-）,女，硕士。主要从事环境工程研究。*通讯作者：冯霞，项目负责人。主要从事应用微生物及其代谢产物研究，参与多项国家部省级项目。FoodandFermentationTechnology第49卷（第2期）Vol.49，No.22013年第2期本研究所用的主要仪器设备信息见表1。1.1.2试剂纳氏试剂的配制：称取10gHgI及7g碘化钾，溶于少量无氨蒸馏水中，另取16gNaOH溶于50m

6、L水中，冷却后混合，并稀释至100mL，待溶液澄清后，倾上层清液于棕色瓶中，避光保存。钼酸铵的配制：于100mL蒸馏水中溶解13g钼酸铵（（NH4）6Mo7O24·4H2O），于100mL蒸馏水中溶解0.35g酒石酸锑钾（KSbC4H4O7·1/2H2O），在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐注入300mL硫酸（1∶1）中，再注入酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。1.1.3菌种分离材料由四川清河科技有限公司提供的水处理基地废液。1.1.4生活污水实验所用的城市生活污水采自成都府南河的支流死水，河水成黑色，流动非常小，位于城区，无工业污水污染，属生活污水。1.1.5

7、培养基基础培养基乙酸钠2.40g，氯化铵0.60g，磷酸二氢钾0.60g，氯化钠1.0g，氯化钙0.05g，磷酸氢二钾1.5g，硫酸镁0.20g，硫酸亚铁0.01g，自来水1000mL，pH8.0，121℃，灭菌20min。分离培养基A培养基：在基础培养基中加入琼脂使得琼脂的含量为0.8%即得。B培养基：在基础培养基中加入琼脂使得琼脂的含量为1%即得。增殖培养基在基础培养基基础上加入0.05%酵母膏和10mg/L生物素。1.2方法1.2.1光合细菌分离纯化方法将四川清河科技有限公司提供的水处理基地废液无菌条件下取1mL梯度稀释，取10-1-10-10

8、稀释度加入灭菌平皿中，然后加入灭菌后冷却到45-50℃的A培养基，混匀。待A培养基凝固后放在50℃的光照培养