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《活性光合细菌制剂的强化培养研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、活性光介细菌制剂的强化培养研究摘要:在光照SOOLux^llOOLux.温度25e~32e的条件下进行活性光合细菌制剂的强化培养研究•结果表叨，以牛肉水提取液为主耍成份，并辅以无机盐、维生素B族及药效植物提取液的培养基，在3〜4天就能培养出活菌数人于50亿/毫升的活性光合细菌制剂，由此证明这种培养基是一种高效、低耗、省时的活性光合细菌制剂的培养方法.关键词:光合细菌(PSB);强化培养;营养液光合细菌(Photosynthesisbacteria)的菌体木身富含蛋白质(60%以上)、维生索、辅酶及多种生理活性物质[1],用它作饲料添加剂，能促进倉畜及水生动物的生长
2、，增强其抗病能力.多年來光合细菌在水产养殖屮的研究应用,取得了显著的净化水质和增产效來[2].目前光合细菌的培养，人多数采用化学试剂的碳源、氮源、矿物元索作为营养液，由于光合细菌是一类利用光能进行一切生理作用的水圈微生物,且总是伴随其他的细菌一起牛长，使得在培养过程中存在着细菌繁殖速度慢、时间长、杂/死菌多等问题[3],特別是在南方的阴用天气和北方的春冬季节，培养时间需要14天以上，活菌浓度低，严重制约了光合细菌的应用市场•因此，研究培养愆吋间、低成本、高浓度的活性光合细菌成为牛物化学领域急待解决的难题.1实验部分1.1主要原料和仪器新鲜牛肉,氯化钠，复合维住素B
3、,磷酸二氢钾，酵母粉，药效植物，pH调节剂高温消毒锅,UV960紫外■可见分光光度计(澳大利亚GBC公司)实验菌株:经鉴定为红螺菌科红假单胞菌，细菌数30亿/ml.1.2培养液组成1.2.1I号培养组成牛肉水提取液100ml,lgNaCl,0.6gKII2P04,蒸僻水900ml,115e灭菌20min,维生素B族0.2g,pH二&0.1.2.2II号培养液组成牛肉水提収液90ml,lgNaCl,0.6gKH2P04,维生素B族0.2g,蒸懈水900ml,药效植物提取液10ml,pH=8.0.1.2.3III号培养液组成牛肉水提取液80ml,酵母粉016g,lgN
4、aCl,016gKII2P04,维生素B族Olig,药效植物提取液20ml,自来水900ml,pH=715.98*收稿口期:2005-02-2&基金项目：广西民族学院重点项目1作者简介:榻金彩(1965-),女，广西横县人，广西民族学院化学与生态工程学院实验师,主耍从事生物材料的研究.1.3培养工艺分别在三角烧瓶、玻璃瓶和塑料壶中进行逐级光合细菌的培养，光照强度800LUX〜llOOLux,温度25e~32e,接种量10旷20%.—级培养采用无菌操作进行,半开放培养采川蒸係水接种，敞开和扩人培养采用处理过的自来水接种•光合细菌计数采用分光光度计测定660nm处光密
5、度值0#D,从已知菌数的不同浓度为光密度值关系求出细菌数.流程如图1所示.图1培养示意图2结果与讨论2.1培养基的选取以往的培养基通常以化学或生物试剂为主•本实验选用牛肉水提取液，有效地保持了牛肉中的蛋白质、氨基酸、微量元素，提高营养液的生物学价值，有利于光合细菌的迅速繁殖•图2是两种培养基的光合细菌生长曲线.图2不同营养液的光合细菌生长曲线u-为I号营养液一级培养光合细菌牛长曲线s-为普通营养液光合细菌生长曲线从图2可看到，木实验采用的营养液3天就达到通常的培养液培养7天的光密度值，细菌数超过50亿/ml.说明牛肉水提取液的生物有效利用率较高.2.2维生素B族的
6、作用酵母粉是良好的维牛索B來源,但由于其含有大量淀粉分子，在培养过程易发生耗氧发酵,对于大规模培养的前期阶段会影响光合细菌活性，使后期扩人培养死菌数增多，发生分层沉淀现象.表1是使用维生素B和酵母的対比实验结果.表1对比结果I号营养液0#D值(4天)镜检结果(杂菌、死菌)存放两周分层厚度(cm)维生素B2.364-0酵母2.533+,++5维生素B+酵母2.391-,+3空口0.955++,+++8从对比情况看，酵母对于促进光合细菌的繁殖速度作用较大，但死菌较多，同时存在杂菌，而使用维生素B可以增强光合细菌的活菌数.因此根据多级培养的需耍，1、II号营养液只使用维
7、生素B,III号营养液使用酵母粉和维生素B.1.3植物水浸液对光合细菌住长的影响实验结果表明，某些植物在一定浓度范围内nJ促进光合细菌的牛:长，结果参见表2.表2植物提取液加入量对0#D660值的影响加入蜃0#D值(%)1天2天3天4天00.5960.8111.0241.35410.7861.2651.8812.43620.8961.5472.2362.74630.8031.5822.0162.634由表2可见当培养液中加入2%植物浸提液时，培养三天光合细菌0#D660可达2.236〜2.746,是対照组的近两倍•山于植物含的有机酸均为弱酸，在培养液中起缓冲作用，
8、可使培养液
