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1、融合标签技术及其应用22卷4期2006年7月生物工程ChineseJournalofBiotechnologyVo1.22No.4July2006融合标签技术及其应用FusionTagsTechnologyandTheirApplications李永进r,陈媛媛r,毕利军LIYong.Jinr.CHENYuan.YuanrandBILi.Jun中国科学院生物物理研究所蛋白质科学研究平台,北京100101ProteinResearchPlatform,InstituteofBiophysics,ChineseAcademyofSciences
2、,Beijing100101,China摘要融合标签最初是作为一种有效的工具用于纯化重组蛋白质,近几年的研究表明,融合标签的作用并不局限于此.本文综述了融合标签技术的发展及在生命科学研究中的各种应用,包括重组蛋白质的纯化;目的蛋白质的检测,定向固定;体内生物事件的可视化;提高重组蛋白质的产量;增强重组蛋白质的可溶性及稳定性.关键词融合标签,重组蛋白质,定向固定,可视化,可溶性中图分类号Q819文献标识码A文章编号1000—3061(2006)04—0523—05AbstractFusiontagsareoriginallydeveloped
3、tofacilitatethepurificationofrecombinantproteinfromcrudeextracts.Inrecentyears,thediscoveryofdifferenttagsandthedevelopmentoffusionstrategymakethefunctionoffusiontagsdiversified.However,therewasnoacure—allfusiontagfordifferentapplications.Weheregiveanoverviewoffusiontagtec
4、hnologyandthedifferentapplicationsoffusiontags,includingthepurification,detectionandorientedimmobilizationofrecombinantprotein,thevisualizationofbioeventinvivo,theenhancementoftheyieldofprotein,theimprovementofthesolubilityandstabilityoftheexpressedprotein.KeywordsFusionta
5、gs,Recombinantprotein,orientedimmobilization,visualization,solubility融合标签技术是20世纪末兴起的一种基于报告基因的重组DNA技术,其主要过程是利用重组DNA技术在靶蛋白编码基因的3端或5端融合某种标签的编码基因,通过适宜的宿主来表达重组蛋白质,表达的重组蛋白质可以通过其融合的标签与包被在固相基质上的特异配基结合而使重组蛋白质得以纯化.融合标签技术的发展最初是为了使重组蛋白质的纯化更加简便,这已为大量的实验所证实.近几年,随着一些新的融合标签系统的开发,其功能也日渐多样化
6、.本文综述了近几年融合标签技术在生命科学研究中的各种应用,包括重组蛋白质的纯化,目的蛋白质的检测和定向固定,体内生物事件的可视化,提高重组蛋白质的产量,增强重组蛋白质的可溶性及稳定性.1融合标签的分类融合标签是一个广义的概念,根据其分子量大小可以分为两大类:大的蛋白质分子(或蛋白质结构域及其衍生物)和小的多肽片段.在大多数情况下,由于多肽标签相对较小,对融合蛋白质结构影响很小,不需要从融合蛋白质中切除,因而多肽融合标签较蛋白质标签更为常用.迄今为止,已有很多文献Received:December6,2005;Accepted:March3,
7、2006.ThisworkwassupportedbyagrantfromtheNationalNaturalScienceFoundationofChina(No.30500097)*Correspondingauthor.Tel/Fax:86—10-64888464:blj@sun5.ibp.ac.an.r:Theseauthorscontributeequallytothework.国家自然科学基金资助项目(No.30500097).ChineseJournalofBiotechnology生物工程2006,Vo1.22,No.4较为
8、详尽地报道了各种融合标签,其大小从几个氨基酸到整个蛋白质,相互作用类型包括了酶与底物,细菌受体与血清蛋白,聚组氨酸与金属离子,抗原与抗体等等,表1列出了目前报道较多的标签融合系统