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1、Smad2／Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响第38卷第2期2007年4月解剖ACTAANATOMICASINICAV01.38.No.2Apr.2007Smad2/Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响卫晓红祁丽花迟晓春董静霞杨京京徐健(北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,北京100083)[摘要]目的研究Smad2/Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响.方法21dsD雌性大鼠,注射PMSG20IU,48h后对卵巢颗粒细胞进行原代培养,用TGF~IRI/抗体及不同浓度的FSH对细胞进行不
2、同时间的处理,通过免疫细胞化学方法观察TG耶信号通路中Smad2/Smad3和P-Smad2/P-Smad3(磷酸化Smad2/3)表达的变化.结果1.Smad2/Smad3主要定位于卵巢颗粒细胞胞质,其活化形式P-Smad2/P-Smad3有少量表达;2.经FSH处理后,Smad2/Smad3向核内转移增多,P-Smad2/P-Smad3的表达增强,并与FSH的作用时间及剂量呈正相关性;3.TGF~RⅡ被抗体完全中和后再用FSH处理,Smad2/Smad3的核阳性率无显着增多,P-Smad2/P-Smad3的表达未见明显增强.结论1.FSH促进Smad2/Smad3的磷酸
3、化;2.FSH对Smad2/Smad3的激活作用与1℃F13受体密切相关.[关键词]Smad2;Smad3;卵泡刺激素;颗粒细胞;免疫细胞化学;大鼠【中图分类号]R322【文献标识码]A【文章编号]0529—1356(2007)02—205THEEFFECTSoFFSHoNTHEPHoSPHoRYLATIoNoFSMAD2/SMAD3PRoTEININRAToVARIANGRANULoSACELLSWEIXiao-hong,QILi.hua,CHIXiao—chun,DONGJing—xia,YANGJing-jing,XUJian(DepartmentofAnatomya
4、ndHistoembryology,SchoolofBasicMedical&PekingUniversity,Belting100083,China)[Abstract]0bjectlveTostudytheeffectsofFSHonthephosphorylationofSmad2/Smad3proteininratovariangranulosacells.MethodsThegranulosacellsof21一day—oldSDfemaleratswereculturedwithTGF~RⅡantibodyandFSHofdifferentconcent
5、rations,andthenthecellswereobtmnedatdefinedpointstodeterminethephosphorylationofSmad2/Smad3byimmunocytochemistry.Results1.BothSmad2andSmad3proteinsweremainlyexpressedinthecytoplasmofovariangranulosacells,andasmallamountofphosphorylated—Smad2/3wereexpressedinthenucleus;2.ThetreatmentwithFSH
6、increasedthenucleartransferofSmad2/Smad3andtheexpressionofP-Smad2/P-Smad3ingranulosacells,TheeffectsofFSHweretimeanddosedependent;3.Theantibody-neudisedTGF1BRⅡinhibitedthestim~ationofFSHonSmad2/3ingranulosacells.Conclusion1.FSHstimulatesthephosphorylationofSmad2/Smad3;2.TheactivationofFSHo
7、nSmad2/Smad3isdependsonTGF~RⅡ[Keywords]Smad2;Smad3;FSH;Granulosacell;Immunocytochemistry;RatTGF~3(transforminggrowthfactor~)超基因家族是一类具有多种生物学活性的生长因子,其在卵泡的生长,发育,闭锁,卵细胞的成熟,甾体激素的产生等方面都有重要的作用….smads是其下游信号传导分子,TG耶首先与TGRⅡ(TG耶receptortypeⅡ)结合,迅速磷酸化TG耶RI(TG耶receptortype
