角毛壳菌抗药性基因转化子的研究

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1、理学硕士学位论文角毛壳菌抗药性基因转化子的研究蒋倩倩哈尔滨工业大学2007年7月国内图书分类号：Q812国际图书分类号：632.08理学硕士学位论文角毛壳菌抗药性基因转化子的研究硕士研究生：蒋倩倩导师：杨谦教授申请学位：理学硕士学科、专业：遗传学所在单位：生命科学与工程系答辩日期：2007年7月授予学位单位：哈尔滨工业大学ClassifiedIndex:Q812U.D.C.:632.08DissertationfortheMasterDegreeinScienceTHERESERCHONTHEPESTICIDERESIST

2、ANCETRANSFORMANTSOFCHAETOMIUMCUPREUMCandidate:Supervisor:AcademicDegreeAppliedfor:Speciailty:Affiliation:DateofDefence:Degree-Conferring-Institution:JiangQianqianProf.YangQianMasterofScienceGeneticsLifeScienceandEngineering2007.7.4HarbinInstituteofTechnology哈尔滨工业大

3、学理学硕士学位论文摘要本实验以角毛壳菌(Chaetomiumcupreum)及其抗药性基因转化子C1、C2为实验材料，对角毛壳菌（C.cupreum）抗药性基因转化子从生理特性、培养特性、生物防治特性、产细胞壁降解酶特性四方面进行研究，为转化子的发酵生产与田间应用提供了科学的理论依据。对角毛壳菌（C.cupreum）转化子生物学特性的研究表明：转化子C1、C2对多菌灵的抗性可达到40~50µg/mL，这比野生型菌株提高了70~80倍。而转化子在菌落形态、生长速度、菌丝形态上与野生型菌株发生了较大的改变，主要表现在菌落颜色变深

4、、生长速度减慢、菌丝间隔变大、子囊壳颜色变深等方面。通过改变不同的培养条件观察转化子的生长状态可知：PSA培养基和基本培养基对转化子的菌落生长和产子囊孢子最为有利，其次为PDA培养基，而查氏培养基最不利于转化子的生长；转化子的最适生长pH值为pH5.5~7，温度为25℃；转化子可以很好的利用半乳糖、蔗糖、果糖为碳源，利用蛋白胨、牛肉浸膏为氮源，而麦芽糖、乳糖、脲素对转化子的生长不利。对转化子室内拮抗作用的研究表明：转化子C1、C2对立枯丝核菌（Rhizoctoniasolani）、杨树叶枯病菌（Aftrnariaaltern

5、ata）、核盘菌（Sclerotiniasclrotiorum）的拮抗作用没有发生改变，对尖孢镰刀菌（Fusariumoxysporum）的拮抗作用与野生型菌株相比有所下降，而角毛壳菌（C.cupreum）及其转化子对大豆疫霉菌（Phytophthorasojae）的拮抗效果都不是很理想。对转化子产细胞壁降解酶的研究发现：角毛壳菌（C.cupreum）及其转化子在5种病原菌细胞壁的诱导下都可以产生β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶，其中以杨树叶枯病菌（A.alternata）和立枯丝核菌（R.solani）细胞壁为诱导物产酶的效

6、果最好。C1、C2与野生型角毛壳菌（C.cupreum）的产酶特性基本相同，只是在产酶时间上比野生型延迟2~3d。通过与室内拮抗作用结果相联系发现角毛壳菌（C.cupreum）和转化子产细胞壁降解酶的活性的高低与它们对病原菌的拮抗作用有关，说明细胞壁降解酶在对病原菌的拮抗作用中起关键作用。综合四方面的研究可以看出：转化子C1、C2是优良的生物防治菌，不-I-哈尔滨工业大学理学硕士学位论文仅自身对植物病原菌显示出良好的拮抗作用，更重要的是它们可以和低剂量的化学农药共同使用，建立起化学防治和生物防治共同作用的综合防治体系，以提高

7、对植物病害的防治效率。关键词转化子；多菌灵；拮抗作用；细胞壁降解酶-II-哈尔滨工业大学理学硕士学位论文AbstractTheexperimenttakesChaetomiumcupreumanditspesticideresistancetransformantsC1,C2asmaterialandresearchesontheC.cupreumcarbendazol-resistancetransformantsfromtheirphysiologicalcharacteristics,culturalcharacte

8、ristics,biologicalcontrolcharacteristicsandcellwalldegradingenzymecharacteristics.TheexperimentcanprovidethescientifictheoryfortheC.cupreumcarben