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1、动物口蹄疫疫苗的研究进展专业：08化工4班摘要：本文是对动物口蹄疫疾病防疫疫苗方面进行了综述，认为防控口蹄疫，传统灭活疫苗起到了重要作用，但其安全性和免疫效果不佳。为克服传统疫苗的种种弊端，目前逐渐开发了口蹄疫新型疫苗，新型的口蹄疫疫苗相对于传统疫苗具有生物安全性好，免疫副作用小，免疫效果好等优点。各种基因工程疫苗的不断涌现，为口蹄疫的防控带来了新的希望。关键词：口蹄疫；疫苗；研究进展口蹄疫的病原为口蹄疫病毒(FMDV),血清型众多,有A、O、C、AsiaI、SAT1、SAT2和SAT3共7个血清型,血清型间无交叉免疫现象。FMDV抗
2、原结构十分复杂,存在广泛的抗原变异。即便是免疫动物，在其接触新病毒后,也可形成隐性感染而持续带毒。更可怕的是，在免疫和非免疫条件下病毒均可适应机体而长期存在。口蹄疫的传播途径分为直接传播途径和间接传播途径，最重要的传播途径是易感动物与发病动物的直接接触。此外，口蹄疫病毒还可通过空气间接地传染给易感动物。接种口蹄疫疫苗是特异性预防口蹄疫的有效方法，在防治中被广泛应用。口蹄疫疫苗主要有弱毒疫苗、灭活疫苗和新型疫苗。目前利用的FMD疫苗主要为灭活疫苗,弱毒疫苗已停止使用。从20世纪80年代开始，基因工程疫苗、合成肽疫苗、病毒活载体疫苗、核酸
3、疫苗等新型疫苗研究日趋活跃，并取得了重大进展和应用，给口蹄疫的有效防控带来了新的希望。现对各种疫苗种类及研究进展作一综述：1、弱毒疫苗FMD弱毒疫苗是把原始病毒通过豚鼠(乳鼠)、鸡胚或细胞连续传代驯化或人工诱变的途径获得的减毒毒株,经接种制苗材料,大量扩增病毒后感染组织培养物并加入一定的保护剂和佐剂制成的病毒制剂。根据国外研究表明，FMDV毒力可以被致弱即减毒。我国在20世纪80年代培育出温度敏感毒株,并培育了O型OP4细胞培养弱毒疫苗。由于该病毒对一种动物的减毒并不一定对其他动物减毒,且新的亚型不断出现及毒株致弱结果和致弱时间都不能
4、确定的原因，目前基本停止了对弱毒疫苗的研究和使用。2、灭活疫苗研究灭活疫苗是目前使用最广泛的疫苗，安全可靠，免疫效果好。在过去很多年，灭活疫苗对口蹄疫的预防、控制都发挥了重要作用。灭活疫苗的缺点是热稳定性差,需要低温保存,免疫持续期短,抗病毒谱有限,不能区分注射疫苗动物和自然感染动物,同时存在病毒灭活不彻底而散毒的可能性。国外学者先后用分子生物学方法证明欧洲暴发的FMD是因使用了灭活不彻底的抗原制备的疫苗所引起。另外灭活疫苗所用种毒均为强毒，所以必须要有严密的防范设施和严格的操作规程，而且存在一定的生物安全隐患。常规灭活疫苗是经一系列
5、试验动物选择的田间毒株经病毒培养系统大量扩增获得的病毒制备物,灭活剂处理后添加佐剂制成的一类生物制品。疫苗生产过程主要包括FMDV的细胞培养,FMDV细胞培养物的浓缩、灭活,佐剂的加入,安全性检验和效力检验等程序。灭活疫苗研究主要有三个重要环节:获取大量的病毒抗原、选择适宜的灭活剂和灭活方法、选择适宜的无毒副作用的免疫佐剂。目前广泛应用二乙烯亚胺(BEI)作为灭活剂。佐剂有氢氧化铝胶、皂素、弗氏不完全佐剂、油包水乳剂等。1930年人类首次成功地实现了FMDV的体外培养，满足了疫苗的规模化生产，并实现了对病毒量化研究。1931年4月在柏
6、林微生物学会首次召开了专题学术会议，确定了FMD疫苗研究的方向。1962年英国开始用乳仓鼠肾传代细胞(BHK-21)培养FMDV，生产灭活疫苗并迅速商业化。目前我国在牲畜口蹄疫强制免疫中主要应用细胞培养病毒的BEI灭活苗,对猪使用O型口蹄疫灭活疫苗,对牛、羊、骆驼和鹿等使用O型-亚洲I型口蹄疫二价灭活疫苗；其中,猪O型口蹄疫灭活疫苗(II)采用猪源口蹄疫强毒株,经BHK21细胞增殖,应用生物浓缩技术提高疫苗中有效抗原含量,使用二乙烯亚胺(BEI)灭活病毒,与矿物油佐剂乳化而制成的高效疫苗,注射剂量为2ML/头,可抵抗200个最小发病量
7、的强度攻击,抗病猪同居感染。3、新型疫苗研究3.1基因工程疫苗基因工程疫苗由于只含有病毒衣壳蛋白,不含有核酸,因而具有很高的安全性。基因工程疫苗的研究在世界各国都有不同程度进展。FMDV抗原结构研究表明,VP1片段是FMDV的主要抗原位点,能诱导机体产生保护性的中和抗体,并能产生部分的保护作用。因此,分离纯化完全的VP1片段或其C端1/2部分就成为人们制备FMDV基因工程疫苗的目标。1975年从口蹄疫病毒分离衣壳蛋白VP1,配以不完全弗氏佐剂,制成了亚单位苗,有良好免疫效果。1981年应用重组技术首次在大肠杆菌中表达了口蹄疫病毒VP1
8、,经融合蛋白制成的实验疫苗,在牛和猪中均可诱导中和抗体的产生。1985年用高浓度的重组DNA的VP1去融合蛋白152Lg或重复接种后,牛可抗A型FMDV的攻击感染。二聚体重复接种使猪也可抗A型FMDV的攻击感染。近年来,
