海洋细胞生物学实验教学大纲

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1、附件二海洋细胞生物学实验教学大纲一、制定本大纲的依据海洋细胞生物学实验大纲是依据《海洋细胞生物学教学大纲》而制定，是海洋细胞生物学课程的实验部分，是理论教学部分的必要补充和实践。适用于学习海洋细胞生物学课程的海洋科学专业学生。二、本实验课程的具体安排实验项目的设置及学时分配序号实验项目名称内容简介（50字左右）实验学时实验要求实验类型实验类别每组人数1细胞液泡系和线粒体的活体染色及显微观察显微镜低倍镜、高倍镜和油镜的使用方法；动、植物细胞活体染色并观察细胞液泡和线粒体的方法。3必修验证专业22植物细胞成

2、分叶绿体和线粒体的分离差速离心法分离植物叶绿体和线粒体；并在显微镜下进行形态观察。4必修验证专业23红细胞凝集试验通过细胞凝集试验进行人类ABO血型鉴定，了解红细胞表面抗原与凝集素的凝集反应。3必修验证专业24单细胞海藻培养技术培养基配置和灭菌，单细胞海藻固体培养方法，单细胞海藻液体悬浮培养。6必修综合专业45大型海藻原生质体的育种技术大型海藻原生质体的分离；原生质体培养和植株再生。8必修综合专业4备注：实验要求：填必修、选修。实验类型：填演示、验证、综合、设计。实验类别：基础、专业等4三、本实验课在该

3、课程体系中的地位与作用本实验课程开设了海洋细胞生物学领域中最常用的实验内容和方法。海洋科学专业在生物化学和海洋生物学中无法涉及而又非常重要的的实验内容，是海洋生物学和生物化学的相互补充和相互贯通。通过讲解、演示和学生动手实验相结合的手段进行实验教学。四、学生应达到的实验能力与标准：通过实验，要求学生认识常规海洋细胞生物学实验的常用实验仪器和工具，掌握相应的实验技术和常规方法；巩固课程所学内容并达到动手能力的提高；了解较先进的海洋细胞生物学实验技术，为进一步学习和研究打下基础。本实验课程主要是加深对理论课

4、程内容的认识和理解，增强学生的实际操作技能，做到理论和实践的有力结合。培养基础理论扎实，而且运用知识和实际操作能力强的人才。五、讲授实验的基本理论与实验技术知识：实验1液泡系和线粒体的活体染色及显微观察【实验内容】显微镜低倍镜、高倍镜和油镜的使用方法；动植物细胞液泡和线粒体的活体染色及显微观察。【实验目的和要求】掌握显微镜低倍镜、高倍镜和油镜的使用方法。掌握动、植物细胞活体染色的原理和相关的技术。【实验仪器、材料和试剂】1、仪器、用具：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、解剖刀、牙签、吸管、载玻片、盖玻片、擦镜

5、纸、吸水纸。2、材料：洋葱鳞茎、人口腔上皮细胞。3、试剂：Ringer溶液、中性红溶液、詹纳斯绿B溶液实验2叶绿体与线粒体的分级分离【实验内容】组织匀浆破碎细胞；差速离心制备叶绿体和线粒体；叶绿体和线粒体显微观察。【实验目的和要求】4了解差速离心法分离细胞器的原理，以及练习使用差速离心法分离哺乳动物的细胞核与线粒体。【实验仪器、材料和试剂】1.仪器、用具：研钵、石英砂、高速冷冻离心机、5mL容量离心管及1.5mL容量心管、移液器、尼龙网或灭菌纱布、玻璃漏斗、可见分光度计、烧杯、载玻片和盖玻片、光学显微镜

6、、镊子。2.材料：新鲜菠菜或豌豆叶。3.试剂：蒸馏水、0.35mol/LNaCL。实验3红细胞凝集试验【实验内容】血清中的抗体或称凝集素可与红细胞膜上不同的相应抗原结合，发生凝集反应，最后发生细胞溶解，本实验主要测定人类ABO血型。【实验目的和要求】了解红细胞表面抗原与凝集素的凝集反应；掌握人类ABO血型测定方法和原理。【实验仪器、材料和试剂】1、仪器、用具：显微镜、双凹玻片或白瓷砖片、一次性刺血针、消毒牙签、玻璃棒、试管架、37℃恒温箱、移液器、滴管、小试管、酒精棉球等。2、材料：自备血液。3、试剂：

7、标准血清（抗A、抗B血清）、生理盐水、75%酒精。实验4单细胞海藻培养技术【实验内容】培养基配置和灭菌；单细胞海藻固体培养方法；单细胞海藻液体悬浮培养。【实验目的和要求】本实验要求通过实验掌握培养基配置和灭菌技术；掌握单细胞海藻固体培养和液体悬浮培养技术。【实验仪器、材料和试剂】1、材料：三角褐指藻等。2、仪器：光学显微镜、超净工作台、灭菌锅、显微镜、长镊子、电炉、烧杯（500ml）、培养皿、移液管等。3、试剂：NaCl、K2HPO4、Na2CO3、Na2-EDTA、柠檬酸铁、CaCl2、MgSO4、F

8、eCl3、MnCl2、CoCl2、CuSO4等。实验5 大型海藻原生质体的育种技术4【实验内容】大型海藻原生质体的分离；原生质体培养和植株再生。【实验目的和要求】本实验的目的是学习和掌握大型海藻原生质体的分离、原生质体培养和植株再生基本方法。【实验仪器、材料和试剂】1、材料：紫菜或江蓠等。2、仪器：光学显微镜、超净工作台、灭菌锅、显微镜、解剖刀、长镊子、电炉、烧杯（500ml）、培养皿、移液管等。3、试剂：MS+NAA或2，4-D（0.5-