生物工程下游技术1

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1、★等电点沉淀法：对于氨基酸和蛋白质等两性物质，在酸性条件下带正电荷，在碱性条件下带负电荷，而在某一pH值下净电荷为零，称为等电点，此时两性物质的溶解度最小，此即为等电点沉淀法。★化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞壁或细胞膜的通透性，从而使胞内物质有选择地渗透出来。★反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到浓缩的效果，这种操作成为反渗透。★离心分离因素：将离心加速度和自由落体加速度的比值称为离心分离因素或离心力与重力

2、比，用公式表示为：K＝Rω2/g。★高压匀浆破壁法：将细胞悬浮在适宜的匀浆液中制成匀浆，在其尚未沉降之前，很快以高压泵将其以很高的流速喷出，这种高速喷出的浆液经过碰撞被迫改变方向而流出，细胞在这一系列过程中经历了高流速下的剪切、碰撞以及由高压到常压的变化，使细胞产生较大的形变，导致细胞壁的破坏。★色谱阻滞因数：溶质在色谱柱（纸、板）中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以Rf表示。★超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。★有机溶剂沉淀法：利用有机溶剂与蛋白质水溶液互

3、溶，在溶解于蛋白质水溶液的同时从蛋白质分子周围的水化层中夺走水分子，降低水溶液的介电常数，破坏蛋白质分子表面的水化膜，从而导致蛋白质分子相互聚集发生沉淀作用。★膜组件：由膜、固定膜的支撑体、间隔物以及收纳这些部件的容器构成的一个单元称为膜组件或膜装置。★膜的水通量：即膜通量，指单位时间内通过单位膜面积的水体积流量。★膜的孔隙率：孔总面积在单位膜上所占面积的比例，空隙率越大强度越差，膜透量越大。★膜的孔径分布：★膜的截留分子量：膜壁上微孔的形状和大小并非完全一致，常使用截留率和截留分子量两个参数共同来衡量，当90%的溶质被膜截留时，

4、在截留曲线上所对应该类溶质的最小分子量即为该膜的截留分子量，用MMCO表示。★树脂工作交换容量：是表示单位质量或单位体积的树脂所能交换的离子（相当于一价离子）的物质的量。其标志离子交换树脂交换能量的大小，是衡量离子交换树脂性能的重要的参数。在一定操作条件下实际测得的交换容量称为工作交换容量，它是指在实际操作条件下单位体积（或中量）树脂中实际参加交换的活性基团，它的大小不是固定不变的，而是与溶液的离子浓度、树脂床的高度、流速、树脂粒度的大小以及交换基团类型等因素有关。★膜的浓差极化：在膜过滤过程中，由于膜的选择透过性，溶剂从高压侧透

5、过膜到低压侧，溶质则大部分被膜截留，积累在膜高压侧表面，造成膜表面到主体溶液问的浓度梯度，促使溶质在膜表面通过边界层向主体溶液扩散，此种现象即为浓差极化。1、电泳用凝胶设备时，过硫酸铵的作用是催化剂，甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂，TEMED的作用是加速剂。2、影响盐析的因素有无机盐的种类、浓度、温度和pH值。3、在结晶操作中，工业上常用的结晶方法有添加晶种、冷却降温和蒸发浓缩。4、晶体质量主要是指大小、形状和纯度三个方面5、狭义的下游技术的含义是指生物产品的分离纯化。6、凝聚作用是通过加入电解质，使双电层电位降低，胶体稳定性下降而

6、相互碰撞凝聚。7、蛋白质的变性是不可逆过程，可通过加热使蛋白变性，以除去发酵液中的杂蛋白。8、常用的细胞破碎技术有高压匀浆法、高速珠磨法、超声破碎法、化学渗透破壁法、酶溶法。9、发酵液预处理方法有加热，凝聚，添加助滤剂。10、凝胶色谱分离的依据是被分离组分在固定相和流动相中的分配系数不同。11、高压匀浆法细胞破碎率的提高方法有提高操作压力（增加破碎次数）。12、发酵液常用的固液分离方法有过滤和离心等。13、膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为微滤，超滤，纳滤和反渗透。14、微生物细胞壁的形状和强度取决于肽聚糖的结

7、构以及含量。15、反复冻融法只适用于无细胞壁的菌体。16、常用的破壁生物酶有溶菌酶，β-1，6-葡聚糖酶，甘露糖酶，蛋白酶。17、依据膜组件的结构可分为管式膜组件、平板膜组件、螺旋卷式膜组件、中空纤维膜组件。18、多糖基离子交换剂包括葡聚糖离子交换剂和离子交换纤维素两大类。19、简单地说，离子交换过程实际上只有外部扩散，内部扩散和化学交换反应三个步骤。20、在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为Q=q0C/(k+C)。21、膜的孔道特征参数有孔径大小、孔径分布、孔隙率。1、生物分离工程可分为

8、几大部分，分别包括哪些单元操作？（简述生物工程下游技术包含的研究内容）生物分离工程包含以下三大部分，其单元操作如下：（1）生物反应器及大规模细胞培养技术。（2）目标产品的分离与纯化技术，主要：①细胞破碎技术、蛋白质的变性复性和固液分离技术；②膜分离