牡丹issr反应体系的优化研究 正交试验设计

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1、---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------牡丹ISSR反应体系的优化研究+正交试验设计摘要:牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr．)是我国的传统名花，花大色艳，花姿优美，被誉为“花中之王”，深受人们的喜爱[1]。随着生物学研究的深入,分子育种在牡丹中的应用将倍受关注.分子标记辅助育种具有快速准确不受环境条件干扰的

2、优点,可以利用与目标性状紧密连锁的分子标记在苗期阶段进行选择,从而大大提高育种速率,加快育种进程。分子标记辅助选择育种的技术关键是与重要性状紧密连锁的DNA分子标记的鉴定。本课题利用正交试验设计，建立并优化牡丹ISSR反应体系；为牡丹F1代进行分子标记多态性分析奠定基础。通过L16（45）正交试验设计，对牡丹ISSR反应体系中Mg2+、dNTPs、Taq25/25---------------------------------------------------------------范文最新推荐---------------------------

3、---------------------------DNA聚合酶、引物和模板DNA浓度5因素进行了优化，并筛选合适引物。牡丹的ISSR最佳反应体系为：反应体系总体积20uL，含10×PCRbuffer，Mg2+3.0mmol•L-1、dNTPs400μmol•L-1、引物1.0μmol•L-1、模板DNA20ng、TaqDNA聚合酶0.5U。关键词：牡丹；ISSR反应体系优化；引物筛选4203OptimizationofISSRReactionSystemofTreePeonyAbstract:P

4、aeoniasuffruticosaAndr.isChina'straditionalflowerandknownasthe"kingofflowers"becauseofitsbigsizeandcolorfulflower[1].Withthedevelopmentofthestudyofbiology,molecularbreedingintheapplymentofPeonyattractingmuchattention.Molecularmarker-assistedbreedinghastheadvantages

5、offast,accurateandwithoutenvironmentalconditions,wecan25/25---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------takeadvantageofthetargettraitscloselylinkedmolecularmarkerstoselectnewvarityintheseedlingstage.Th

6、usgreatlyimprovingthebreedingrateandspeedupthebreedingprocess.ThekeyofMarker-assistedselectionbreedingtechnologyistheidentificationofDNAmolecularmarkers.Tightlylinkedwiththeimportanttrait.Inthispaper,wecreateandoptimizePeonyISSRreactionsystemusingorthogonaldesign;andprovidetheor

7、eticalfoundationforthepolymorphismanalysisofPeonyF1generation.2.4ISSR-PCR扩增及检测112.5ISSR-PCR反应体系单因子试验11325/25---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------结果与分析123.1正交试验结果分析及反应体系确定123.2ISSR反应体系的优化133.2.1

8、不同Mg2+浓度对ISSR扩增的影响133.2.2不同dNTP浓度对ISSR扩增的影响133.