临床检验技术操作手册

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1、检验在线-www.labbbs.com-医学检验专业站第一节临床血液学检验血常规检查【标本】抗凝静脉血（有些仪器也可用末梢血）。【方法】血液细胞自动分析仪测定法。【试剂】血液细胞自动分析仪配套试剂。【操作】详见自己实验室血液细胞自动分析仪使用手册。【附注】1.血常规包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞比积、血小板计数等项目。这些项目亦有相应的手工方法，详见有关资料。2.半自动及全自动血液细胞分析仪从设计上均要求用抗凝静脉血。其优点为：（1）静脉血能正确地反映病人实际情况，重复性好；（2）利于延长仪器的使用寿命；（3）解决了

2、采血盘的交叉感染问题等。3.血细胞计数应用EDTA·K2：为抗凝剂（EDTA·K2·2H2O1.5～2.2mg可抗凝1ml血）。4.贮血容器应选用有盖塑料管。抗凝血采集后在室温中贮存应不超过6h；如需制作血涂片应在2h内完成。5.测定前必须将EDTA·K2抗凝血充分混匀。6.血细胞分析仪测定最适温度为18～22℃，低于15℃或高于30℃，均可使细胞体积发生改变，影响各参数的结果。7.血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段，当白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板的任何一项有明显升高或降低；白细胞分类出现异常结果（中间细胞群百分率≥8.0%

3、）；红细胞、白细胞和血小板的任何一个直方图出现异常图形等情况，须用显微镜检查及分类。嗜酸性粒细胞直接计数【标本】末梢血或抗凝静脉血。【方法】直接计数法。【试剂】1.Hinkelmann液；2.乙醇-伊红稀释液；3.伊红-丙酮稀释液。【操作】1．小试管中加稀释液0.38ml。2．常法取末梢血20ul，加入管内混匀，待红细胞溶解后两侧充池。3．静置3～5min，用低倍镜（必要时用高倍镜）镜下计数10检验在线-www.labbbs.com-医学检验专业站个大方格内嗜酸性粒细胞数。总数×20×106=嗜酸性粒细胞/L。【附注】1.血液稀释后应于1h

4、内计数完毕。2.充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛。3.住院病人采集标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。红细胞沉降率测定【标本】抗凝静脉血。【方法】魏氏法。【试剂】109mmol/L枸橼酸钠溶液。【操作】1.3mm×100mm试管1支，在2ml容量处刻上记号，加抗凝剂0.4ml。2.静脉采血后，取下针头，加血至刻度，旋转混合。3.用血沉管（300mm×2.5mm）吸取上述混匀血液至"0"刻度处，拭去管外附着的血液，将管垂直立在血沉架上。4.记时，室温中静置1h，观察血浆高度，以红细胞下沉的毫米数报告之。【附注】1.红细胞在单位时间内

5、下沉的速度与血浆蛋白的量与质，血浆中脂类的量和质，红细胞的大小与数量，是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。2.标本采集时应空腹。3.血液和抗凝剂的比例要准确。4.血沉管内径要标准（2.5mm），放置要垂直。5.做血沉的标本要在采集后3h内测定，并充分混匀。6.室温过低、过高和贫血时，对结果有影响。为此，血沉应尽量放在18～25℃室温下测定。室温过高时血沉加快，可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢，无法校正。 网织红细胞计数【标本】末梢血或抗凝静脉血。【方法】百分计数法。【试剂】10g/L煌焦油

6、蓝生理盐水溶液或10g/L煌焦油蓝ACD溶液。【操作】1.于小试管中滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液或煌焦油蓝ACD溶液。2.加入末梢血或静脉血2滴于上述试管中，混匀。3.静置15～20min后，取用1滴制成薄片。4.油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数，以百分率或绝对值报告。【附注】检验在线-www.labbbs.com-医学检验专业站1.活体染色时间不能过短，室温低时，放37℃温箱。2.网织红细胞也可用Miller窥盘计数法、荧光染色或流式细胞仪计数。 嗜碱性点彩红细胞计数【标本】末梢血。【方法】百分计数法。【试剂】1.甲醇；2.碱性亚

7、甲基蓝染液（保存2～3周）。【操作】1.按常法制成薄血片，自然干燥后，用甲醇固定3min。2.用碱性亚甲基蓝染液染色1～2min，水洗待干。3.用油镜计数1000个红细胞中嗜碱性点彩红细胞数，以百分率报告。【附注】1.用碱性亚甲基蓝染液染色后，红细胞呈浅蓝绿色，嗜碱性点彩呈深蓝色。2.也可用瑞氏染色，嗜碱性点彩呈蓝黑色。3.由于点彩红细胞分布不匀，必要时扩大计数红细胞数。红斑狼疮细胞检查【标本】静脉血。【方法】改良血块法。【操作】1.抽取患者血液2～3ml，注于干燥试管内，于室温待凝。2.于凝固刚形成时，用竹签将凝块搅碎，并将残余凝块除去。

8、3.以2000r/分钟离心沉淀10分钟，使白细胞聚集在同一层面，以利于狼疮细胞形成。4.置37℃温箱内温育2h。5.取出白细胞层及其上下各少许，置红细胞比积管中，以2000r/分