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1、红车轴草最佳采收期的研究红车轴草最佳采收期的研究作者:陈封政,李书华,王雄清【摘要】目的为确定红车轴草最佳采收期提供依据。方法采用紫外分光光度法测定红车轴草不同采收期异黄酮的含量,同时计算各个生长期的产量。结果红车轴草在现蕾期和初花期的异黄酮含量较高,分别为1.80%和1.79%。结论建议红车轴草在初花期时采收。【关键词】红车轴草;采收期;异黄酮 Abstract:ObjectiveToidentifytheoptimalharvesttimeformaximalcontentsofisoflavonesinTrifoliumPratense.Method
2、sllltravioletspectrophotometrywasusedtodeterminethecontentsofisoflavonesinTrifoliumpratense.ResultsThecontentsofisoflavonesinTrifoliumpratensewerethehighestintheinitialfloweringstageandthebuddingstage.ConclusionTrifoliumPratenseshouldbeharvestintheinitialfloweringstage. Keywords:T
3、rifoliumpratense;Collectingtime;Isoflavone 红车轴草TrifoliumPratenseL?为豆科多年生草本植物,又名红三叶、红菽草、三叶草等,现在我国巳进行大面积栽培。文献报道其提取物具有抗肿瘤,治疗胃溃疡、胃癌、乳腺癌和骨质疏松症等作用[1],其主要活性成分为异黄酮类化合物,如大豆素、染料木素和鹰嘴豆芽素等[1,2],这些异黄酮化合物具有植物雌激素样作用,能够双向调节人体内的激素水平,当人体雌激素水平不足时,它与人体雌激素受体结合,产生弱雌激素作用,以弥补人体自身雌激素的不足;当人体雌激素水平过高时,它与人体雌激
4、素受体结合,从而阻止人体自身所分泌的雌激素与受体结合,达到降低人体雌激素水平的目的,因而对妇女有关体内激素方面的疾病具有预防、保健和医疗作用[3],其提取物广泛用作保健食品或功能食品的原料,因而倍受人们关注。但目前尚未见到红车轴草最佳采收期的研究。为此,我们以有效成分异黄酮为目标,结合不同生长期植株的产量,研究了红车轴草不同采收期的含量和植株产量,为其确定合理采收期提供科学依据。 1材料 红车轴草TrifoliiimPratenseL.采自乐山师范学院生物基地不同生长时期(分蘖期、现蕾期、初花期、花后期)的植物地上部分;鹰嘴豆芽素对照品(含量>98%),
5、购自Sigma公司;DV762紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);电子天平(FC204,上海精科实业有限公司);恒温水浴锅(H-H-S216C,上海医疗器械五厂):植物粉碎机(FZ102,天津市泰斯特仪器有限公司);试剂均为分析纯。2方法与结果2.1红车轴草的前处理采收不同生长期的红车轴草植物地上部分,除去泥沙和杂草,6(TC鼓风干燥5h,粉碎。2.2测定波长的选择将鹰嘴豆素对照品、红车轴草异黄酮提取液配成适当浓度,在200?400nm波长范围内进行光谱扫描,二者吸收曲线类似,均在258.5nm处有最大吸收,故选择285.5rrn为测定波长□2.
6、3对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的鹰嘴豆芽素对照品4.0mg置于50ml容量瓶中,加入95%的乙醇溶解,并定容至刻度,摇匀,即可。2.4标准曲线的制备精密吸取0.3,0.6,0.9,1.2,1.8,2.4ml标准液,分别置于10ml容量瓶中,各自加入95%的乙醇1ml,加蒸馏水定容,摇匀,在波长258.5nm处测定吸收值。得回归方程为:C=0.00956A+0.00004,r=0.9993,结果表明,鹰嘴豆芽素对照品在2.4?19.2pg/ml范围内,浓度与吸光度线性关系良好。2.5供试品溶液的制备准确称取不同釆收期的红车轴草干粉5.00g,置于索氏提取
7、器中,加入95%的乙醇50ml,置于6CTC水浴锅中回流提取1.5h,回流提取2次,合并滤液,即为样品提取液。精密吸取不同采收期的样品提取液0.8ml,置于100ml容量瓶中,加入9.2ml95%的乙醇,然后用蒸馈水定容,摇匀,即为供试品溶液。2.6样品含量测定取不同采收期的供试品溶液,在波长285.5nm处测定吸收值。通过标准曲线,计算不同采收期总异黄酮的含量。结果见表1。表1不同采收期红车轴草总异黄酮的含量(略)2.7稳定性实验初花期供轼品溶液于室温分别放置0,30,60,90,120rain后依样品含量测定步骤进行测定,RSD=2.22%,表明样品溶液
8、放置120min稳定性好。2.8重复性实验取初花期供