高级生化考题(小字)

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1、名词解释蛋白质部分1.盐溶：低浓度的中性盐可以增加球状蛋白的溶解度，此现象称为盐溶。2.盐析：当盐浓度增高时，如半饱和或饱和状态，蛋白质溶解度降低，从水溶液中沉淀出来。此现象称为盐析。3.透析：利用蛋白质大分子不能透过半透膜，而小分子杂质如无机盐、单糖等能透过半透膜的性质，使蛋白质与小分子杂质分开。4.超过滤：利用压力，强行使水和其他小分子杂质透过半透膜，而蛋白质被截留在膜上以达到分离目的的方法，对蛋白质溶液有分级作用，且有浓缩和除盐作用，可分离不同分子量的蛋白质。5.高效液相层析：6.电泳：指带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动的现象。7.亲和层析：利用生物大分子物质

2、能与相应的配基专一可逆结合的性质，如蛋白质分子能对配基专一性地结合或复合物，改变条件不能解离，利用这种特性而设计的一种层析技术。8.离子交换层析：是一种用离子交换脂作为介质，即离子交换剂的层析法。9.蛋白质一级结构：指多肽链上各种氨基酸的排列顺序，即氨基酸残基序列。10.二面角：由C2-N,单键旋转和C22-C2单键旋转角度决定的相邻二个肽平面在空间上的相对位置的夹角。11.二级结构：由多肽链主链骨架折叠产生的由H键等次级键系得构象单元或局部空间结构。主要是肽键本身的盘旋方式而不涉及侧链的构象及其它链的关系。12.超二级结构：由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成

3、有规则的在空间上能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构体。13.结构域：对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽键在超二级结构的基础上组装或二个或俩个以上的相对独立的三维实体，再缔合成三级结构，这种相对独立的三维实体既结构域。14.贝塔转角：由四个连续的AA残基组成，由第一个AA的C=0与第四个AA的H-N形成H键，两个Ca原子之间的距离小于0.5nm.15.伽玛转角：伽玛转角由多肽链上3个连续的AA残基组成，主链骨架以180度返回折叠，第一个残基的C=0与第三个残基上的N-H形成氢键。16.欧米格环：由不超过16个残基组成的肽段，环的首尾两个残基间的距离小于0.1nm，以亲水残基为主

4、，故总位于蛋白质分子表面，该环与生物活性有关。17.DNS-CL-EDMAN法：是将高灵敏度的DNS技术与能连续降解的Edman反应有机结合起来的一种测定氨基酸排列顺序的方法。18.Bohr效应：血红蛋白与氧气的结合，受PH及二氧化碳浓度的影响，在周围组织低PH及高二氧化碳的情况下，血红蛋白与氧气的亲和力下降，反之在肺部微血管中，二氧化碳被释放，氢离子浓度下降，PH值升高，血红蛋白与氧气的亲和力下降，这种PH与二氧化碳浓度对血红蛋白与氧气的结合及释放的效应称为Bohr效应。1、简述考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理及该法的主要优缺点？答：考马斯亮G-250在游离状态下是棕红色，当它

5、与蛋白质通过疏水作用结合后，呈现蓝色，前者的最大吸收在465nm，后者在595nm，在一定的范围内，吸收度与蛋白质含量成正比。可用于蛋白质的定量测定。该法反应十分迅速，仅2分钟左右蛋白质与考马斯亮G-250即可达到稳定结合，反映比较灵敏，重复性也好，但tris,EDTA,尿素等对测定有一定的干扰。2、根据分子大小不同分离纯化蛋白质的方法有哪些？举出三种方法简述其原理？答：透析，超过滤，密度梯度区带离心，凝胶过滤，高效液相层析。透析：利用蛋白质大分子不能透过半透膜，而小分子杂质如无机盐、单糖等能透过半透膜的性质，使蛋白质与小分子杂质分开。超过滤：利用压力，强行使水和其他小分子杂质透

6、过半透膜，而蛋白质被截留在膜上以达到分离目的的方法，对蛋白质溶液有分级作用，且有浓缩和除盐作用，可分离不同分子量的蛋白质。凝胶过滤法：当大小不同的蛋白质分子混合物流经凝胶层析柱时，必凝胶珠网孔达的蛋白质分子不能进入珠内网孔结构，而被排除在凝胶珠外，随着缓冲液在凝胶珠之间的空隙向下移动，并最先流出柱外，比网孔小的蛋白质分子能够不同程度地进出凝胶珠网孔内外，从而这些大小不同的蛋白质所经的路径不同，随着缓冲液向下移动，较大的蛋白质分子移动路程较短，先下来。较小的后下来。3、根据溶解度差异分离纯化蛋白质的方法有哪些？举出三种方法简述其原理？答：盐溶，盐析，有机溶剂法，蛋白质沉淀剂法，等电

7、沉淀法。盐溶：低浓度的中性盐可以增加球状蛋白的溶解度，此现象称为盐溶。主要是由于蛋白质分子吸附某种盐离子后代电层使蛋白质分子彼此排斥，而蛋白质分子与水分子之间的相互作用却加强，因而溶解度增高。盐析：当盐浓度增高时，如半饱和或饱和状态，蛋白质溶解度降低，从水溶液中沉淀出来。此现象称为盐析。主要是由于大量中性盐的加入，盐离子与水这种偶极分子作用，使水分子的活度降低，原来溶液中的大部分甚至全部的自由水转变为盐离子的水化物，导致蛋白质的水和程度减少，从而驱使蛋白质的溶解度降低。蛋白质沉淀