蔬菜中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留快速检测的影响因素研究(2)

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1、植物保护学现代农业科技2014年第17期蔬菜中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留快速检测的影响因素研究张云霞(甘肃省庆阳市农产品质量安全监督管理站，甘肃庆阳745000)摘要蔬菜中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留快速检测的影响因素研究结果表明，检测室内温度、待测样品的放入时间、叶绿素含量、样品前处理等均会影响检测结果，最佳的检测条件为检测室温度18—25℃，待测样品放入时间10s内、样品的前处理时间3~4min．转速180—200r／min。关键词蔬菜；有机磷类；氨基甲酸酯类；农药残留；影响因素中图分类号$481．8文献标识码A文章

2、编号1007—5739(2014)17—0132—02近年来，农业生产中农药被大量使用，部分农药会直接或间接残存于蔬菜、水果、畜禽产品以及土壤中，直接或间接地危害人们的身体健康。我国使用的农药中，有机磷农药占到70％。蔬菜农药残留快速检测技术[-21是根据农药中主要有机磷和氨基甲酸酯类农药残留研发的一种生化检测法。仪器使用快速方便、操作简单、成本较低，不受时间、场地的限制。蔬菜的水分、碳水化合物、蛋白质和酯类等成分不会对样品的农药残留测定造成干扰，适合范围广。此法适用于各种叶菜、果菜以及根菜类(除胡萝卜、韭菜、蘑菇等)中的有机

3、磷类(如甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果等)和氨基甲酸酯类(如抗蚜威、克百威等)等农药残留的快速检测。但是，试验过程中的影响因素p卅较多，重现性不好，对多次出现阳性的样品，需用气相色谱法进一步确认。1材料与方法1．1试验材料供试仪器为NC～800农药残毒快速测定仪、电子天平(精确度0．01g)、样品混合器、微量加液器(10～100L、1-5mL)。供试试剂为pH=8缓冲液：分别取磷酸氢二钠15．0g与无水磷酸二氢钾1．59g，于500mL蒸馏水中溶解；乙酰胆碱酯酶：试剂盒中提供的酶试剂可直接使用，存于2～8qC冰箱中；底物：碘化硫代乙

4、酰胆碱(BTCI)，用缓冲液溶解，存于2～8℃冰箱中：显色剂：二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)，用缓冲液溶解即可。1．2试验方法1．2．1农药测定。NC一800农药残留检测仪采用酶抑制法，依据《GB厂r5009．t99—2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检~g)(NY／448—2001蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法》，快速测定出待检样品中农药残留的大小n叫。1．2．2技术指标。波长：412nm；零点透光率漂移：≤0．5％／3rain；抑制率测量范围：0—100％；光电流漂移：1．0％／3rain；

5、透射比准确度：士2．0％；测量重复性：≤1．0％。1．2．3样品提取。取有代表性的新鲜黄瓜样品，擦去表面泥土，切成1cm左右的表皮样品，取2g放入100mL三角瓶中，用5mL加液枪分2次共加入10mL缓冲液，振荡50次，于另一个三角瓶中滤出上清液即为待测试液。1．2．4对照测试。在1cm比色皿中，用100txL的微量移作者简介张云霞(1985一)，女，甘肃庆阳人，助理农艺师，从事农产品质量安全检测工作。收稿日期2014—07—25液器加入酶100IxL，将(1—5mL)加液器一次性加入缓冲液2．5mL，混匀，再加入显色剂10

6、0L，用2OL的微量移液器加入底物20仙L。摇匀后及时放入仪器样品池，按“对照测量”键进行测试【。1．2．5样品测试。在1<3I1比色皿中，用微量移液器(100L)加入酶100IxL，加入待测试液2．50mL，混匀．静置10rain(用计时器计时)，再加入显色剂100L，加入底物20。摇匀后及时放入仪器样品池，按“样品测量”键进行测试。1．2．6抑制率的计算。以分光光度计测试(412rim波长)时，按下式计算抑制率：s(％)=f(AAAA)／AAdxlO0(1)式(1)中：s为抑制率；△A。为对照溶液反应3ainr吸光度的变化

7、值；△A为样品溶液反应3ainr吸光度的变化值。农药残留快速测试仪检测时其抑制率一般可自动计算。样品的抑制率≤40％为合格样品，4JD％～50％为可疑农残超标样品，抑制率≥50％，表示样品中含有有机磷和氨基甲酸酯类农药，为阳性结果。一般而言，抑制率≥50％的样品需要重复检验2次以上，多次出现阳性结果时，可用气相色谱等方法进一步确认。2结果与分析2．1检测室内的温度对检测结果的影响速测仪对坏境温度要求比较严格，分别在2、l0、18、22℃的环境条件下对同一批样品平行测定5次，其结果见表1。从表1可以看出．速侧仪在环境温度为2、1

8、0℃温度下的抑制率偏大．在室温附近18、22℃的温度下检测结果较为接近。因此，检测温度应控制在18～25℃时，检测结果较为准确，避免在低温环境下作业速测仪。2．2待测样品的放入时间对检测结果的影响对同一样品进行测试，放入底物后分别于5、10、15、20、40、60s后放入光路