饲料中花生四烯酸水平对凡纳滨对虾免疫相关基因表达及抗菌

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1、第40卷第5期水产学报Vol.40,No.52016年5月JOURNALOFFISHERIESOFCHINAMay,2016文章编号:1000–0615(2016)05–0763–13DOI:10.11964/jfc.20150609949饲料中花生四烯酸水平对凡纳滨对虾免疫相关基因表达及抗菌能力的影响赵利斌1，王鑫磊1，黄旭雄1,2,3*，陈春燕1，李航1(1.农业部淡水水产种质资源重点实验室，上海海洋大学，上海201306；2.上海市水产养殖工程技术研究中心，上海201306；3.水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心，上海201306)摘要：为了评估饲料中花生四烯酸(ara

2、chidonicacid，ARA)水平对凡纳滨对虾免疫相关基因表达及抗菌能力的影响，分别以鱼油和混合植物油为脂肪源，设计了2个系列共9组不同ARA含量的等氮等能，且具备相同饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)和n-3/n-6比例的实验饲料，投喂对虾6周后，检测各组对虾在急性感染溶藻弧菌0、24、36和42h时鳃组织中Toll受体、IMD(immunedeficiency)和溶菌酶mRNA表达量，并统计感染后96h内对虾的死亡情况。结果表明：①对虾摄食以鱼油为脂肪源的饲料[饲料DHA(22:6n-3)和EPA(20:5n-3)含量分别为5.85

3、和3.83mg/g饲料]，其鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA表达量均随饲料中ARA含量的升高呈现先升高后下降的变化；0.56(B组)和0.87mgARA/g饲料组(C组)对虾溶菌酶mRNA表达量显著高于0.44(A组)、1.02(D组)和0.28mgARA/g饲料组(E组)(P<0.05)；对虾摄食以植物混合油为脂肪源的饲料(DHA和EPA含量分别为3.28和1.87mg/g饲料)，其鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA表达量随饲料中ARA含量的升高而升高；1.44mgARA/g饲料组(I组)对虾Toll受体mRNA表达量显著高于0.19mgARA/g饲料组(

4、F组)(P<0.05)。②人工急性感染溶藻弧菌后，各组对虾鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA的表达量随感染进程均出现显著变化。摄食以鱼油为脂肪源的饲料时，对虾鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA表达量峰值均出现在0.56mgARA/g饲料组(B组)，且峰值分别出现在感染后24、42和24h。摄食以混合植物油为脂肪源的饲料时，对虾鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA表达量峰值均出现在1.44mgARA/g饲料组(I组)，且峰值分别出现在感染后24、42和36h。③各实验组对虾急性感染溶藻弧菌后96h累积死亡率无显著差异。本研究表明，饲料ARA水平影响凡纳滨

5、对虾免疫相关基因(Toll受体、IMD和溶菌酶)的表达，且ARA调控免疫基因表达的效果受饲料EPA和DHA水平的影响。关键词:凡纳滨对虾；花生四烯酸；溶藻弧菌；Toll受体mRNA；IMDmRNA；溶菌酶mRNA中图分类号:S963文献标志码:A凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)是我国养虾类总产量的一半以上[1]。近年来，高密度养殖殖范围最广且产量最大的虾类养殖品种，据统模式下各种应激和疾病的暴发严重制约了凡纳计2011年我国凡纳滨对虾的产量为123.3万t，占滨对虾养殖效益和产业的可持续发展[2]。养殖过收稿日期：2015-06-30修回日期：2015-11-

6、02资助项目：上海市科委项目(14320502000)；上海市教委知识服务平台项目(ZF1206)通信作者：黄旭雄，E-mail:xxhuang@shou.edu.cnhttp://www.scxuebao.cn764水产学报40卷程中对虾应激反应和疾病的暴发与对虾自身免究显示，饲料中添加Vc[20]、铜[21]、锌[22]和酵母提疫机能密切相关[3]。研究表明饲料中脂肪酸水平取物[2]会影响凡纳滨对虾免疫相关基因的表达。会影响动物的免疫力[4]。花生四烯酸(20:4n-6，有关饲料ARA水平是否影响对虾免疫相关基因ARA)是细胞膜的重要组成物质，在维持细胞膜表达尚未见报道。本研

7、究分别以鱼油和混合植的流动性及机体炎症和免疫反应中起重要调节物油作为脂肪源，设计了2个系列9组等能等氮且作用[5-8]。在鱼类[9-10]、长巨牡蛎(Crassostreagigas)[11]具有相同饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸和Crassostreacorteziensis[12]中已证实，饲料ARA(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)和n-3/n-6比例水平可以调节机体免疫抗菌机能。的不同ARA水平实验饲料，旨在探讨不同先天免疫系统是凡纳滨对虾抵御外界病原微DHA