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时间:2018-07-13
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1、广藿香内生真菌类群分析及其抗菌活性研究关键字:广藿香内生真菌类群分析及其抗菌活性研究本文为Word文档,感谢你的关注! [摘要]从广藿香的根、茎、叶中共分离得到72株内生真菌,根据ITS序列分析鉴定为25属40个种,其中拟茎点霉属Phomopsis、刺盘孢属Colletotrichum、镰刀菌属Fusarium为优势种群;广藿香内生真菌的分布存在明显的组织特异性,以茎中内生真菌的分布最多,占分离菌株总数的78%;活性测试结果显示共有15个属34株内生真菌至少对1种供试菌具有抗菌活性。结果表明广藿香内生真菌多样性丰富,部分菌株具有明显的抑菌活性,值得进一步深入研究。 [关键词]内生真
2、菌;多样性;广藿香;抗菌活性 [Abstract]Seventy-twostrainsofendophyticfungiwereisolatedfromroots,stemsandleavesofPogostemoncablinandidentifiedas40speciesof25generabasedonITSsequencesanalysis.Amongthem,Phomopsis,ColletotrichumandFusariumweredominantgenera.DistributionofendophyticfungiinP.cablinshowedobvioustis
3、sue-specificity,andmorestrainswereisolatedfromstemswithanisolationrateof78%.Thebioassayresultsindicatedthat34strainsof15generadisplayedantimicrobialactivitiesagainstatleastoneoftestbacteriaorplantpathogenicfungi.TheresultsobtainedinthisstudyshowedthatendophyticfungiinP.cablinwererichinspeciesdiv
4、ersity,andsomestrainsexhibitedstrongantimicrobialactivities,whichdeservefurtherresearch. [Keywords]endophyticfungi;diversity;Pogostemoncablin;antimicrobialactivity 植物内生真菌是指生长在植物体的根、茎、叶及果实等组织和器官内的一类真菌,是植物微生态系统中的重要组成成分,在进化过程中与宿主植物形成了互惠共生的关系[1]。内生真菌不但能产生结构丰富多样的次生代谢产物,已从中分离出多种生物活性物质,包括抗菌、抗肿瘤、抗氧化等天
5、然化合物[2-3],而且对植物的生长发育、活性成分的积累及植物抗逆性具有重要影响[4]。药用植物中同样存在着大量的内生真菌[5],中药成分的形成、种植、抗病性及道地性可能都与内生菌有密切的关系[6],因此,研究药用植物内生真菌资源的多样性不仅可以丰富真菌资源宝库,而且对于中药资源的保护和可持续利用具有重要的意义。 广藿香Pogostemoncablin(Blanco)Benth.为唇形科Lamiaceae刺蕊草属PogostemonDesf.植物,是十大广药之一,其入药最早记载于唐代《新修本草》和《千金翼方》中,自宋、金、元以来已广泛应用于临床。它具有芳香化浊、和中止呕以及发表解暑的
6、功能,用于胸闷不舒、寒湿闭暑、腹痛吐泻、鼻渊头痛的治疗[7]。现代药理学研究表明,广藿香具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化、杀虫等作用[8-11]。目前,对广藿香内生真菌的研究鲜有报道,为了探讨广藿香内生真菌的多样性、群落组成及其分布特征,本研究对其内生真菌进行了系统的分离和鉴定,并对分离得到的菌株发酵粗提物进行抗菌活性研究,旨在筛选出具有良好抗菌活性的菌株,为广藿香内生真菌的资源保护和开发利用提供基础资料和科学依据。 1材料 1.1仪器与试剂RE-2000型旋转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂;超净工作台,上海恒益科技有限公司;YXQ-WY21-600电热高压蒸汽灭菌锅,广州市华南医疗器械有限公
7、司;THZ-C-1摇床,广州市正一科技有限公司;Mastercyclergradient5331PCR仪,Eppendof公司;EPS3501电泳仪,AmershamPharmaciaBiotech公司。氨苄青霉素、硫酸卡那霉素、二甲基亚砜(DMSO),均购自Sigma公司;Taq酶、DNA提取试剂盒,均购自大连宝生物工程有限公司;乙酸乙酯,广州化学试剂厂。 1.2植物与内生真菌广藿香植物于2012年10月采自广东阳春市马水镇,由广东药科大学
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