护骨素对人骨巨细胞瘤体外单核基质细胞培养影响的研究

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1、ｌＪｆｆＩ【ｉ医科凡学ＭＩ学何沦土分类号单位代码１０１１４密级学号２００５６１１护骨素对人骨巨细胞瘤体外单核基质细胞培养影响的研究研究生：亟丕全指导教师：昌蟹熬援合作指导教师：申请学位门类级别：塞９ｄ！面熬援匡堂亟±专研所联业究在系名方学方称：向：院：式：置处型置肚疸置瘟出耍匡型太堂筮三监庭匡堂瞳立堑！：８３５Ｑ§Ｑ１２００７年５月０６Ｒ英文缩写词索引缩写ＧＣＴＳｔｃ０ＰＧＲＡＮＫＲＡＮＫＬＦＣＭＭＴＴＯＢ０ＣＴＮＦＰＩ英文全称ｇｒｅａｔｃｅｌｌｔｕｍｏｔｔｒｓｔｒｏｍ

2、ａ］一ｌｉｋｅｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓＯｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎＲｅｃｅｐｔｏｒａｃｔｉｖａｔｏｒｏｆＮＦ・ｒ，ＢＲｅｃｅｐｔｏｒａｃｔｉｖａｔｏｒｏｆＮＦ－１ｃＢｌｉｇａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｅｒｔｈｉａｚｏｌｅｃｈｒｏｍａｔｏｍｅＵｙｏｓｔｃｏｂｌａｓｔｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ７中文全称骨巨细胞瘤单核基质细胞护骨素，骨保护素细胞核因子ＫＢ受体活化因子细胞核因子ＫＢ受体活化因子配基流式细胞仪噻唑蓝比色法成骨细胞破骨细胞肿瘤坏死因子增

3、殖指数¨ＩＩＩｌＩ医科人中融Ｉ学仲沦Ｚ学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。文中任何引州他人的成粜．均已做出明确标注或得到许可。论文内容术包含法律意义上已属丁：他人的任何形式的研究成果．也不包含本人已用于其他学位中请的论文或成果。与我一同Ｉ：作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明井表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：１、交回学校授予的学位证书；２、学校可在相关媒体上对作者奉人的行为进行通报；３、本文按照学校规定的方式，对因不当取得

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5、应遵守此规定）论文作者签名：指导教师签名：闩期：２丝］年—＿＝￡月—臣一只只期：２堡２２年—上月—厶Ｆ１ｖ（本声明的版权归山西医科人学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用３１ＩＩ州瞄科大々碗Ｉ于ｌｆ，沧丈护骨素对人骨巨细胞瘸体外单核基质细胞培养影响的研究摘要・目的：利用细胞培养技术原代培养骨巨细胞瘤单核基质细胞（Ｓｔｒｏｍａｌ．１ｉｋｅｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ，Ｓｔｃ）并进行细胞鉴定。研究护骨素（Ｏｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ，ＯＰＧ）对体外骨巨细胞瘤（Ｇｉａｎｔｃｅｌｌｔｕｍｏｒｓ，ＧＣＴ

6、）的抑制增殖、诱发凋亡的作用，为ＧＣＴ新的辅助治疗方案的确立提供初步的实验依据。方法：用胶原酶一∥消化法体外分离培养８例新鲜ＧＣＴ标本进行分离培养获得原代Ｓｔｃ并进行传代；四种传统方法测定细胞的基本性质；噻唑蓝比色法（ＭＴＴ）测ＯＰＧ对Ｓｔｃ的细胞毒性作用；流式细胞仪（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｅｒ，ＦＣＭ）检测Ｓｔｃ细胞周期比例的改变以及凋亡率的变化情况；电镜观察实验组细胞核超微结构变化：ＤＮＡ．Ｌａｄｄｅｒ测定ＯＰＧ对ＧＣＴ单核基质细胞ＤＮＡ影响．ｊ结果：用胶原酶一刀消化的方法可以获得较高纯度的Ｓｔｃ，细胞的

7、基本性质测定符合ＧＣＴ主细胞性质：ＭＴＴ法结果示：ＯＰＧ浓度在１００ｌ，ｔｍｏｌ／Ｌ范围内，随着ＯＰＧ剂量的增加（０．１、０．０１、１，１０、１００１１ｍｏｌ／Ｌ），细胞的吸光度减小，ＯＰＧ浓度为１０ｕｍｏｌ／Ｌ时，不同作用时间（１２、２４、４８、７２ｈ），细胞的吸光度不同，４８ｈ组最小，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；流式细胞仪结果示：ＯＰＧ以不同浓度（１、１０、１００ｌＩｍｏｌ／Ｌ）分别作用４８ｈ后，细胞凋亡率及增殖指数（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ，ＰＩ）分别与对照组比较差异有统计学意义（

8、Ｐ＜０．０５）；电镜观察到细胞胞质浓缩、核凝聚、核碎裂和凋亡小体形成；ＯＰＧ作用４８ｈ（１００ｕｍｏｌ／Ｌ）后ＤＮＡ－Ｌａｄｄｅｒ梯形条带明显，对照组细胞ＤＮＡ条带只有一条。‘结论：在一定浓度范围内，ＯＰＧ可能会抑制入ＧＣＴ单核基质细胞增殖，诱导细胞凋亡。【关键词】护骨素，骨巨细胞瘤，单核基质细胞，细胞培养，凋亡５ｂ州医科人学碗１．卞付沧土ＥｆｆｅｃｔｏｆＯＰＧｏｎｔｈｅｓｔｒｏｍａｉ－ｌｉｋ