血液rna提取试剂盒

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时间:2018-07-11

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1、◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外使用说明◆EASYspin全血RNA快速提取试剂盒◆目录号1106◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外-4-EASYspin全血RNA快速提取试剂盒目录号:1106目录编号包装单位11060120次11060250次v适用范围:适用于快速提取全血总RNAv试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存20次50次10X红细胞裂解液RLB

2、室温10ml25ml裂解液RLT室温20ml50ml去蛋白液RW1室温15ml40ml漂洗液RW室温5ml10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-freeH2O室温10ml10ml70%乙醇室温4mlRNase-freeH2O9mlRNase-freeH2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free吸附柱RA和收集管室温20套50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。-6-储存事项:1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。2.不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响

3、使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。v产品介绍:红细胞裂解液选择性裂解红细胞,然后独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解白细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的RNasefreeH20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。v产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产

4、试剂盒膜质量不稳定的弊端。2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。3.反复优化的红细胞裂解液配方,裂解效果快速完全。4.快速,简捷,单个样品操作一般可在40分钟内完成。5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。-6-v注意事项:1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!2.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf5415C或者类似

5、离心机。3.需要自备乙醇,β-巯基乙醇,一次性注射器,研钵。4.裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。5.预防RNase污染,应注意以下几方面:1)经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。2)使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。3)RNA在裂解液RLT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5MNaOH中浸泡10分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNas

6、e。4)配制溶液应使用无RNase的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)6.关于DNA的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的EASYspin系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR扩增过程中极其微量的DNA残留(一般电泳EB染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大,如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:-6-1)选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不

7、能作为模板参与扩增反应。2)选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。3)将RNA提取物用RNase-free的DNaseI处理。本试剂盒还可以用于DNaseI处理后的RNA清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。4)在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱RA上进行DNaseI处理。请联系我们索取具体操作说明书。2.RNA纯度及浓度检测:完整性:RNA可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;

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