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时间:2018-07-11
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1、选手班级:选手姓名:选手学号:标本号:血糖测定(葡萄糖氧化酶法)竞赛时间:15分钟一、说明1.本题满分100分,完成时间15分钟。2.要求独立完成,不得相互询问或讨论。3.考核成绩为操作过程评分、操作结果评分和考核时间评分之和。4.全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额。二、实验原理葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸(D-葡萄糖酸δ内酯),并产生过氧化氢:葡萄糖+2H2O+O2葡萄糖酸+2H2O2在色原性氧受体(如联大茴香胺、4-氨基安替比林偶氮酚)的存在下,过氧化物酶催化过氧化氢,氧化色原物质,生成有色化合物。其颜色深浅与血清葡萄糖含量成正比。三、实验器材721分
2、光光度计、小号试管≤7支、试管架1个、手动可调式移液器5~50μl、1ml和10ml刻度吸管各两支、记号笔1支、水浴箱、擦镜纸,废物容器等。四、实验试剂葡萄糖标准液、生理盐水、0.1mol/L磷酸盐缓冲液、酶试剂、酚试剂等组成的试剂盒。五、实验标本新鲜血清。六、操作步骤取3支小试管,按表进行操作。先配制10ml酶酚混合试剂(试剂比例R1:R2=9:1)。加入物(ml)测定管标准管空白管血清0.03葡萄糖标准应用液0.03生理盐水0.03酶酚混合试剂3.03.03.0混匀,置37℃水浴中,保温10min,分光光度计波长500nm,比色杯光径1.0cm,以空白管调零,分别读取标准管和测定
3、管的吸光度。4七、数据记录与计算1.数据记录标准管吸光度测定管吸光度裁判签名确认2.计算血清葡萄糖浓度(写出计算公式及过程)裁判签名确认八、报告(如:血清葡萄糖:△.△△mmol/L)。裁判签名确认4选手班级:选手姓名:选手学号:标本号:血糖测定(葡萄糖氧化酶法)评分标准序号项目考核内容分值扣分标准扣分得分1准备工作报告参赛项目及序号5漏缺一项1着白大衣、帽、口罩、手套并按要求佩戴参赛签着装不整、漏缺某一项1仪表端庄、头发符合要求仪容、着装不整1小号试管、试管架、移液器及配套吸头、记号笔1支缺选及多选、台面凌乱1检查仪器、试剂、标本状态并摆在操作台合理位置无检查12操作①试管编号②空
4、白管加蒸馏水30µl③标准管加葡萄糖标准液30µl④测定管加血清30µl⑤各管分别加酶工作液3ml⑥各管置37℃水浴保温10分钟取出比色12试管无编号1空白管加蒸馏水1标准管加葡萄糖标准1测定管加血清30µl1各管分别加酶工作液1加液顺序错1加错液1加液量不准确1无混匀1混匀不规范1无水浴1水浴时间不准确1反应液无倒回原试管23用722分光光度计比色①调波长(500nm)②清洗比色杯,将各管溶液倒入比色杯,置比色槽中③调“T100%”和“T0”,重复2次④进行比色测定,记录读数,反应液倒回原试管⑤回位至显示器出现“100.0”13无调波长14⑥洗干净比色杯(三次)调波长不准1无调T1
5、00%1无调T01分光光度计闭盖预热1双手碰触变色杯光滑面1比色后无洗干净比色杯1未用擦镜纸擦拭比色杯1比色杯未正确放比色槽1显示器未稳定时读数1比色液体未达杯高一半1反应液无倒回原试管1读数不准确14数据与报告原始记录完整、规范5不完整、不规范1单位正确不正确1公式正确不正确1计算方法正确不正确1报告完整、正确不完整、不正确15计数结果相对误差=(︱X-T︱/T)(X为计数值,T为靶值)56(︱X-T︱/T)×56分、相对误差≥20%扣56分6文明操作操作完成后台面的处理1摆放无序,用物随意放1将使用过的一次性物品弃入污物缸或指定位置。1使用过的一次性物品未放入污物缸1仪器的保护1
6、损坏仪器1注意生物安全防护1划伤手和血标本外流等1实验后洗手实验后不洗手17总体印象安全,规范,流畅,完成质量好5从生物安全,规范操作,完成质量等方面考虑58完成时间不延时,超过规定时间5分钟,终止比赛每超时1分钟 ,倒扣2分9合计100现场裁判签名:结果评分裁判签名:复核裁判签名:现场裁判长签名:4
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