辛伐他汀对压力超负荷大鼠apn、il6及心肌肥厚影响论文

《辛伐他汀对压力超负荷大鼠apn、il6及心肌肥厚影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、辛伐他汀对压力超负荷大鼠APN、IL6及心肌肥厚影响论文【摘要】目的观察辛伐他汀对压力超负荷大鼠血清脂联素（APN）、白细胞介素6（IL6）水平以及心肌肥厚的影响，探讨该类药物影响心肌肥厚可能的作用机制。方法实验动物随机分对照组、心肌肥厚组、治疗组，每组10只。应用经典的腹主动脉结扎方法，制备压力超负荷大鼠模型。治疗组大鼠给予辛伐他汀5mg/kg每日清晨灌胃，连续6周。心肌肥厚组和对照组同时以同等剂量的9g/L的氯化钠溶液每日清晨灌胃，直至术后6周。采用鼠尾测压法测定大鼠血压的变化；酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清APN、

2、IL6浓度。实时定量PCR检测心肌组织中IL6、脂联素受体1(AdipoR1)的mRNA表达。称量法计算各组大鼠心脏质量及心脏质量/体质量比值，并观察心肌的病理学改变。结果心肌肥厚组大鼠血清APN水平、IL6水平、心脏质量、心脏质量/体质量比值、左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径，以及心肌IL6、AdipoR1mRNA表达与对照组相比差异有显著性（q=3.41～31.83,P0.01）。治疗组大鼠与心肌肥厚组相比血清APN水平、IL6水平、心脏质量、心脏质量/体质量比值、左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径以及心肌IL

3、6、AdipoR1mRNA表达差异有显著性（F=3.57～329.93,q=3.11～31.08.freelL/kg）腹腔麻醉后行剑突下正中切口，于双侧肾动脉分支近心端处将腹主动脉与七号针头结扎在一起后，抽出针头，脏器恢复原位，缝合切口。对照组只实行相同的手术程序，不结扎腹主动脉。术后3d大鼠恢复后，从尾动脉测定收缩压，连续观察血压的变化。心肌肥厚模型选取术后2周血压维持在21.33kPa以上的大鼠用于实验。术后2周治疗组大鼠给予辛伐他汀（由默沙东制药有限公司提供）5mg/kg每日清晨灌胃，连续6周。心肌肥厚组和对照组同时以

4、同等剂量的9g/L的氯化钠溶液每日清晨灌胃，直至术后6周。1.3取材处死动物前称体质量，处死后取心脏称质量，计算心脏质量/体质量比值。在距心尖与心底等距离处横行切断心脏，心底端置40g/L的甲醛溶液固定，进行病理学实验；心尖端置液氮保存，进行分子生物学实验。1.4大鼠血清APN、白细胞介素6（IL6）浓度检测采用酶联免疫吸附实验法（ELISA），实验方法参照试剂所提供操作指南，结果在全自动酶标仪上进行比色分析。1.5实时定量RTPCR检测心肌细胞脂联素受体1(AdipoR1)、IL6的mRNA的表达取冻存心肌组织约10

5、0mg，剪碎,用Trizol试剂1000mL提取总RNA(具体步骤参见试剂说明书)。应用引物Oligod(T)18和Random逆转录合成cDNA。配置PCR体系，应用SYBRGreenⅠ荧光染料技术扩增待测基因及内参基因所用引物。见表1。反应条件：第一次循环95℃10s；然后以95℃5s,60℃50s,进行40次循环；最后进行溶解曲线分析。以阴性对照GAPDH作为参考，计算机分析Ct值，即每个反应管内荧光强度达到系统认为的有目的DNA合成时的循环数，用以评定各因子mRNA的实时定量相对表达水平。以上试剂及引物均由宝生物工程(

6、大连)有限公司提供。1.6病理学检测将甲醛固定的心脏组织做成石蜡切片，经苏木精伊红染色后拍照，用ImagePlus图像分析软件测量左心室前壁、侧壁、后壁和室间隔的厚度，并取平均值即为左心室壁的平均厚度；在显微镜下放大40倍后再拍照，每张切片随机选取10个视野，每个视野选10个细胞，用ImageProPlus软件测每个细胞的面积，取平均值后计算出其等效面积圆的直径，即为心肌细胞平均直径。1.7统计学处理实验结果以±s表示，采用SPSS11.5统计软件进行单因素方差分析,两组间比较用q检验。2结果2.1各组大鼠血清脂联素、I

7、L6水平的变化腹主动脉结扎术后8周，心肌肥厚组大鼠血清脂联素、IL6水平与对照组比较差异有显著性（F=33.55、87.63,q=11.23、18.66,P0.01）；治疗组血清脂联素、IL6水平与心肌肥厚组比较差异有显著性（q=5.62、10.66,P0.01）。见表2。2.2辛伐他汀对大鼠心脏病理学改变的影响3组大鼠体质量比较差异无统计学意义。心肌肥厚组心脏质量、心脏质量/体质量比值、左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径与对照组比较差异有显著性（F=3.57～329.93，q=3.41～31.83,P0.01）。治疗组

8、心脏质量、心脏质量/体质量比值、左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径与心肌肥厚组比较差异有显著性（q=3.11～31.08，P0.01）；心脏质量、心脏质量/体质量比值与对照组比较差异无统计学意义（q=0.30、0.75，P0.05）；左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径与对照组