压力超负荷对大鼠心肌高能磷酸盐代谢的影响

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1、压力超负荷对大鼠心肌高能磷酸盐代谢的影响【关键词】心室肥厚线粒体高能磷酸盐大鼠　　　　Abstract:ObjectiveToexploretheeffectsofpressureoverloadonhighenergyphosphatescontentanditsdistributionofleftventricularhypertrophyinrats.MethodsMaleSDratsizedinto4groups：coarctationofabdominalaorta5operationgroup(SH5,SH15group).Thehemodynam

2、icsandventriclarremodelingparameterseasured.Ventricleofheartovedandmitochondriayocardiumandmitochondriaeasuredbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC).ResultsLeftventricularhypertrophyoperationgroup,ATPandcontentofadenineacidpooldecreasedsignificantlyinmyocardiumbothinCAA5groupan

3、dCAA15groupasyocardiuminCAA15group.ATPandcontentofadenineacidpoolinmitochondriadecreasedsignificantlyinCAA15group.ConclusionMyocardialhighenergyphosphatescontentanditsdistributionderangedduringpressureoverloadinrat.Thesefindingssuggestedthatimbalanceofenergygenerationandutilizationm

4、ightplayacriticalroleinhypertrophyanddisfunctionofheart.　　Keyitochondria;highenergyphosphates;rat　　心肌肥厚是心力衰竭发展、猝死、心肌梗死等心血管事件发生的重要危险因素。心脏是高耗能的器官，代谢率高，高能磷酸盐是心肌细胞生命活动可以直接利用的能源，心肌的收缩有赖于ATP和肌酸磷酸(PCr)水解所产生的能量。已有研究证明梗死后重构心肌能量产生不当可能是心力衰竭发生及发展的重要因素［1］。但对于压力超负荷后肥厚心肌高能磷酸盐含量和分布的改变却少有报道，因此研究心肌能量

5、代谢状态的变化，有助于揭示压力超负荷时心功能障碍的机制，对改善肥厚心肌的心功能，预防心力衰竭等心血管恶性事件的发生具有重要意义。　　1材料与方法　　1.1试剂与仪器Epaverlab电生理记录仪(Poinalaortagroup，CAAgroup)：采用腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉后，打开腹腔、暴露左肾，距左肾动脉开口上方5mm处剥离腹主动脉，旁置一6号针(直径0.6mm)，一号丝线结扎后抽出针，使腹主动脉缩窄达65%～70%，术后常规抗感染3d，观察5周(CAA5周)、15周(CAA15周)。②假手术组(shamoperationgroup，SH)：在腹主动脉

6、相同部位穿线但不结扎血管，余同腹主动脉缩窄组，术后分别观察5周(SH5周)、15周(SH15周)。③对照组：正常对照。所有动物自由饮食水。　　1.3指标测定及方法　　1.3.1心功能测定：术后观察期满，将各组大鼠麻醉满意后，行右颈动脉插管，应用生理记录仪记录主动脉、左心室压力曲线。测量左室舒张末压(LVEDP)、平均主动脉压(MAP)及左室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)。完成压力曲线记录后立即取出心脏，称取左心室(包括室间隔)重，以左心室重/体重作为相应的心肌肥厚指数(LVariuaz等［2］的方法加以改进。在带冰渣的线粒体分离介质中充分剪碎心室

7、肌组织，4℃条件下分离心肌线粒体，1h内完成。线粒体蛋白质浓度测定用Log，迅速置于液氮中，然后放入预冷的HClO4中剪碎、匀浆。冰上放置5min破细胞膜。12000rpm、4℃离心20min。取上清200μL加入适量1mol/LK2CO3充分混和，调整体系pH值在6.5～7.0之间，于冰上放置5min。12,000r/min、4℃离心10min。取上清液20μL于高压液相色谱仪分离并测定ATP、ADP、AMP及PCr含量，计算总腺苷酸池(ATP＋ADP＋AMP)大小，结果以nmol/mg组织表示。色谱条件：色谱柱hypersil18，5u，4.6mm×250

8、mm。流动相为0.2mol/L磷酸盐缓