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1、葫芦巴联合氨基胍对糖尿病大鼠肾脏内皮素及血栓素B2等的影响论文黄川锋康爱英袁国卿【摘要】目的研究糖尿病大鼠内皮素（ET），血栓素（TXB2），糖化血红蛋白（HbA1c），超氧化物歧化酶（SOD）等含量的变化，探讨葫芦巴联合氨基胍对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法利用链脲佐菌素(STZ)55mg/kg腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。实验大鼠分为正常对照组(NC组)、糖尿病对照组(DM组)、糖尿病葫芦巴治疗组(FS组)、糖尿病葫芦巴+氨基胍治疗组(FS+AG组)，于第8周测定ET，TXB2，HbA1c.freelinoguani
2、dineonkidneysofdiabeticratsanditsmechanism.Methods55mg/kgStreptozotocin(STZ)odel,andtheratsalcontrolgroup(groupNC),diabeticcontrolgroup(groupDM),Fenugreekseedsdiabetestreatmentgroup(groupFS),FS-aminoguanidineDiabetestreatmentgroup(groupFS+AG).ET,TXB2,HbA1c,SODlevels
3、easuredintheeighthinlevelsintreatmentgroupsdecreasedsignificantly,inoguanidinebinationcannotonlysignificantlyreduceET,TXB2,butalsoincreaseSODlevelsofkidneysindiabeticrats,meanprovetherenalhemodynamicandenhanceantioxidantcapacity,preventdiabeticnephropathy.Keyinoguan
4、idine；ET；TXB2;SOD糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)常见的慢性并发症之一，也是DM致残致死的主要原因。DN的发病机制在病因学上是复杂多样的，现认为与遗传因素、血流动力学异常、糖脂代谢异常和细胞因子等众多因素有关，目前确切机制仍不十分明确。氨基胍对糖尿病大鼠的肾脏具有保护作用，但对糖尿病大鼠无明显降低血糖作用［1］。葫芦巴为豆科葫芦巴属一年生草本植物，药食兼用。最新发现葫芦巴所含的“葫芦巴苷”(共有19种不同的分子结构)具有出色的降血糖作用［2］，但其作用机制及对糖尿病大鼠肾脏的保护作用未见报道。本文研究葫芦巴联
5、合氨基胍对糖尿病大鼠ET，TXB2水平的影响，探讨其对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。1器材与方法1.1试剂及仪器链脲佐菌素(STZ)、氨基胍(Aminoguanidine,AG),美国sigma公司生产；葫芦巴种子(FenugreekSeed,FS,天益堂)；HbA1c，TG，TC试剂盒(上海科华)；ET试剂、TXB2试剂(美国ADL)，购自上海天呈科技有限公司；SOD，尿蛋白定量试剂盒(南京建成公司)。DimensionRXL全自动生化分析仪(美国杜邦)，电子天平，高速冷冻离心机，LabsyspemsMULTINKANM
6、S酶标仪(芬兰)，AycoCARDREADERⅡ全定量特种蛋白金标检测仪(挪威)，TU-1810紫外分光光度计(北京普析通用)。1.2葫芦巴水煎液制备将葫芦巴种子研磨成粉末，筛网过滤，取葫芦巴粉250g加水温火煎煮至2500ml(100mg/ml)。1.3动物模型的建立与分组选择40只体重为180～220g雄性SD大鼠(郑州大学实验动物中心)，喂以基础饲料，自由进食、饮水，适应环境一周后，随机选择8只为正常对照组（NC组），其余按照55mg/kg体重的剂量腹腔注射1%STZ(临用前溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液，pH4.2～
7、4.5，经微孔滤膜过滤除菌），对照组注射等量柠檬酸钠缓冲液。48h后采用断尾法取血，测定空腹血糖(FBG)≥16.7mmol/L的大鼠即为DM大鼠（共26只），造模成功的大鼠随机分为3组，每组8只。糖尿病葫芦巴治疗组(FS组)葫芦巴1.0g/(kg·d）灌胃；糖尿病葫芦巴+氨基胍治疗组(FS+AG组)，葫芦巴1.0g/(kg·d）灌胃，氨基胍(1g/L)以饮水方式给药［3］［相当于50mg/(kg·d）］；糖尿病对照组(DM组)和NC组每天以同体积生理盐水灌胃。每周称1次体重，根据体重变化调整给药量。每组分两笼喂养，自由进食和
8、饮水。1.4标本采集及检测各组大鼠于第8周末次给药后禁食12h，收集24h尿液，称重后腹腔注射20%乌拉坦(5ml/kg)麻醉，腹主动脉抽血，取1ml血液用EDTA抗凝用作HbA1c测定(金标法)；取2ml血液分离血清用作FBG，TG，TC测定(酶法)，用全自动生化分析仪进行
