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时间:2018-07-11
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1、子宫内膜癌中VEGF论文【关键词】,,血管内皮生长因子C;血管内皮生长因子受体,;淋巴转移;,子宫内膜肿瘤【摘要】目的研究子宫内膜癌组织中血管内皮生长因子C及其受体mRNA的表达情况,分析其在肿瘤转移中的作用。方法采用RTPCR法分析48例新鲜子宫内膜癌组织标本中VEGFC/KDR/Flt4mRNA的表达情况,并分析其与各临床病理参数之间的关系。结果48例子宫内膜癌组织中的VEGFC及其受体mRNA表达率明显高于正常子宫内膜组织,肿瘤组织中VEGFCmRNA表达与Flt4mRNA的表达呈显著正相关。结论V
2、EGFC可能在子宫内膜癌转移尤其是淋巴转移中起重要作用,是一个反映病人淋巴转移和预后的良好指标。【关键词】血管内皮生长因子C;血管内皮生长因子受体;淋巴转移;子宫内膜肿瘤【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionofvascularendothelialgroetrialadenocarcinomatissueinpursuitoftheirroleintumormetastasisandotherclinicalsignificance.Methods48
3、freshendometrialadenocarcinomatissueinedbyRTPCRtodetecttheVEGFC/KDR/Flt4mRNAexpression.ResultsThereRNAexpressionbetorandthenormalcontrols.AndthereRNA,KDRmRNAorflt4mRNAexpressionaofcervix.Buttheexpressionorpathology,lymphnodemetastasis,tumorsizeandtheinvas
4、ionofdeepmuscularlayer(P005).ConclusionTheresultssuggestthattheVEGFCmayplayanimportantroleinthelymphnodemetastasisanditcouldbeausefulbiologicalmarkertoforeseethelymphnodemetastasisandprognosisforcervicalcancer.【Keyphaticmetastasis,cervicalneoplasm子宫内膜癌是严重
5、威胁妇女生命的第三大恶性肿瘤.freelRNA在子宫内膜癌组织中的表达,并探讨其在肿瘤转移中的作用。1资料与方法1.1研究对象48例子宫内膜癌组织和36例正常子宫内膜组织均来自2003年1月-2004年12月我院妇科手术切除标本,均经病理证实。患者年龄32~71岁,中位年龄52.2岁。按FIGO标准分期,Ⅰb2期15例,Ⅱa期20例,Ⅱb期13例;按G)引物均委托上海生工公司合成,VEGFC、KDR所用引物序列参照了以前研究者的设计[2]。根据VEGFC及KDR引物Tm值,DNAstar软件设计了Flt4
6、的引物序列(见表1)。表1引物序列引物序列Tm值片段163根据QIAGENOneStepRTPCRKit的说明,在同一反应体系中同时扩增β2MG、VEGFC、KDR及Flt4的4对引物,为去除多重PCR反应中的扩增竞争,较为准确地获得不同靶基因的扩增结果,体系中使用QIAGENOneStepRTPCRKit试剂盒提供的Q溶液。根据紫外分光光度仪检测的OD值计算RNA样品浓度,将RNA样品稀释,以保证RTPCR体系中RNA模板加样4μl时,所加的模板含量基本一致,即首先做到模板定量。具体PCR循环参数为:变
7、性94℃60s,退火52℃60s,延伸72℃90s,共35个循环。最后延伸72℃10min以获得更多的扩增产物。1.3.3扩增产物半定量分析:PCR反应扩增产物4μl加4μl载样缓冲液加15μl溴酚兰,以05×TBE为电泳缓冲液,在2%琼脂糖凝胶上80V恒压电泳40min。将电泳结果用凝胶成像仪扫描记录并借助凝胶图像分析系统(BioCapTV.10)测定灰度。以VEGFC、KDR、flt4和βactin条带灰度值之比作为相对光密度。13.4统计学处理:用SSPS统计软件(11.0版本)进行,所用的统计学方
8、法为卡方检验,P<005认为有统计学意义。2结果2.1VEGFC及其受体mRNA在肿瘤组织(T)及正常子宫内膜组织(N)中的表达VEGFC阳性者可见320bp条带,flt4阳性者可见402bp条带,KDR阳性者可见555bp条带(见图1)。各项指标在肿瘤组织中的表达率均明显高于正常子宫内膜组织,其具体表达率见表2。图1子宫内膜癌组织中VEGFC及其受体KDR、Flt4mRNA的表达。表2VEGFC及其受体mRNA在不同组织中的
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