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时间:2018-07-10
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1、三七总皂甙对吗啡戒断大鼠海马磷酸化CREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性的影响论文闫玉仙,呼文亮,丛斌,牛增强,李淑瑾,余磊,马春玲,张国忠.freelpusofmorphinepusofthemorphinedependentratsandthenaloxoneprecipitatederats,andtoexplorethemechanismbyorphineptominrats.METHODS:Themodelsofmorphinephysicaldependentratsandeorphinein
2、graduallyincreasingdosesandabdominalcavityinjectionofnaloxonerespectively.Theratsinistrationatvariousdosessimultaneouslyinistratedorphine.TheeffectsofmorphineontheexpressionsofCREB,pCREB,CREB/DNAbindingactivityinhippocampusobilityshiftassay(EMSA).RESULTS:①T
3、heCREBproteinexpressioninhippocampusorphinephysicaldependentgroup(MOR),naloxoneprecipitatedpuspusinducedbynaloxoneprecipitatedpusinadosedependentmanner.【Keyorphinedependence;naloxone;substancee;pCREB【摘要】目的:研究三七总皂甙(PNS)对吗啡依赖及纳络酮催促戒断大鼠海马组织CREB,pCREB蛋白表达及CREB/
4、DNA结合活性的影响,探讨PNS抑制吗啡戒断症状的作用机制.方法:应用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡建立吗啡躯体依赖模型,采用腹腔注射纳络酮建立催促戒断模型,大鼠在给予吗啡的同时,采用4种不同剂量PNS进行灌胃.采用SA)分别观察PNS对吗啡依赖及戒断大鼠海马组织总CREB,pCREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性的影响.结果:①不同剂量PNS组、吗啡成瘾(MOR)组及纳络酮催促戒断(NAL)组大鼠海马组织总CREB蛋白表达与对照组相比无显著性差异(P0.05);②MOR组pCREB蛋白表达及CREB/DNA
5、结合活性数值略高于对照组(P0.05),NAL组pCREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性数值明显高于对照组和MOR组(P0.01);③PNS可以剂量依赖性的抑制纳络酮催促戒断所引起的pCREB蛋白表达增高和CREB/DNA结合活性的增强.结论:PNS可以剂量依赖的抑制吗啡成瘾及纳络酮催促戒断诱导的大鼠海马组织CREB磷酸化和CREB/DNA结合活性的增强.【关键词】三七总皂甙;吗啡依赖;纳络酮;物质戒断综合症;磷酸化CREB0引言三七(Panaxnotoginseng(Burk)F1H1Chen)为五加科
6、植物,现已从不同部位分离得到数十种单体皂甙成份,其中三七总皂苷(PanaxNotoginseng,PNS)是三七的主要生物活性成份,具有活血化淤、抗氧化、抑制细胞内Ca超载、改善学习记忆、调节神经系统、增加免疫功能等功效,是一种非特异性钙拮抗剂.关于PNS对吗啡成瘾大鼠戒断综合症的研究国内外至今尚未见报道.我们研究了PNS对吗啡依赖及戒断大鼠核转录因子CREB磷酸化以及DNA结合活性的影响,探讨PNS在戒毒方面的应用及机理.1材料和方法1.1材料健康雄性SD大鼠42只,体质量200~220g,华中科技大学同济
7、医学院实验动物学部提供,合格证号19020;盐酸吗啡(morphinehydrochloride,MOR),沈阳第一制药厂生产,批号:辽宁药准字(1996)第002747号.盐酸纳络酮、氨基甲酸乙酯、亮肽素(leupeptin)(美国Sigma公司);CREB及pCREB抗体(美国SantaCruz公司).PNS(天津天士力联合制药股份有限公司提供),EMSA试剂盒(美国Promega),[γ32P]ATP(北京福瑞生物公司),MultiphorⅡ多功能电泳系统.凝胶成像分析仪(美国UVP公司).1.2方法1
8、.2.1动物模型的制作及分组模型鼠随机分为对照组(Control),吗啡依赖组(MOR),纳络酮催促戒断组(NAL)和PNS50,PNS100,PNS200,PNS400组(PNS50,100,200,400mg/kg治疗组),每组6只.MOR组、NAL组和PNS组参照文献记载以剂量递增法连续5d背部皮下给予(sc)吗啡的方法建立吗啡依赖大鼠模型.首日吗啡20mg/kg,分2次(sc)(8:00,1
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