颈深肌肌梭密度及背根节nt3和trk c 表达与退变性颈椎失稳关系论文

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时间:2018-07-10

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1、颈深肌肌梭密度及背根节NT3和TrkC表达与退变性颈椎失稳关系论文【摘要】目的研究人颈深肌肌梭密度及神经营养因子3(NT3)、酪氨酸激酶C(TrkC)在相应背根神经节中的表达随年龄变化的规律,探讨它们在颈椎失稳中的作用。方法经甲醛固定1年以内的尸体12具,按年龄分为婴儿组5具,青少年组3具,老年组4具,测定其颈深肌群中的颈长肌及头夹肌肌梭密度,应用免疫组化的方法观察NT3、TrkC在相应背根节神经元的表达。结果婴儿组颈长肌、头夹肌肌梭密度均高于青少年组及老年组(F=19.28、93.47,q=7.1

2、1~16.58,P0.01).freelancervicaldeepmusclesandimmunohistochemicallocalizationofNeutrophin3andtyrosinekinaseCinhumandorsalrootganglion,andfindtheirrelationalininedandtheexpressionsoftheNT3andTrkCindorsalrootganglionsmunohistologically.ResultsIninfantgroup,

3、thespindledensityongthethreegroups(F=19.28,93.47;q=7.11-16.58;P0.01),nosignificantdifferencemunohistochemicaldyeingofNT3andTrkCintheteenagergroupentofdegeneratedcervicaldestabilization,.freel×2.0cm的组织块(共24个组织块),去除其表面的筋膜及脂肪,进行脱水、透明、浸蜡和包埋;根据神经支配区域性的特点,取标本的

4、C3~C4神经节(共48个神经节),去除表面的筋膜和脂肪,同样进行脱水、透明、浸蜡和包埋。左右两侧的组织均选入实验中。1.2实验方法1.2.1肌梭的密度测定将颈长肌、头夹肌组织块分别进行连续性横切片,切片厚度为10μm,根据BOYDCLARK等7的实验结果(人的肌梭的长度范围约在1.5~4.0mm),每隔1.5mm取1张切片,以避免重复计数肌梭密度。共取240张切片,其中婴幼儿组100张,青少年组60张,老年组80张,分别行苏木精伊红(HE)染色,采用Olympus显微镜(200倍)和图像分析仪计数肌

5、梭的个数,同时利用SamplePCI软件测量切片截面积,按以下公式计算该组肌肉的肌梭密度:肌梭密度=肌梭个数/切片面积(mm2)8。1.2.2NT3及TrkC表达的检测采用免疫组化染色方法。将各组背根神经节组织块连续横切,切片厚度为5μm,用NT3及TrkC兔抗血清(滴度均为1∶100)在同一条件下对各组切片行ABC免疫组织化学染色,DAB显色,然后脱水、封片,在Olympus显微镜下观察NT3、TrkC在背根神经节的分布。NT3、TrkC阳性表达细胞均呈棕黄色染色,100倍视野下随机取100个

6、阳性细胞,用SamplePCI软件对染色结果进行定量分析。1.3统计学处理应用SPSS12.0统计软件进行数据处理,结果以±s表示,数据间比较采用F检验及t检验。2结果2.1不同年龄标本肌梭形态观察及密度的比较HE染色切片上,肌纤维及肌梭均呈淡红色,肌梭位于肌束之间,大多呈单个的散在分布,附近有小血管,也见肌梭以联合体形式存在。随着年龄的增长,肌梭形态结构发生了一定的变化,主要表现为肌梭体积增大、囊腔扩大及肌梭纤维结缔组织囊增厚。不同年龄组颈长肌及头夹肌肌梭的密度不同,婴儿组高于青少年组及老年组(F=1

7、9.28、93.47,q=7.11~16.58,P0.01),青少年组与老年组无明显差异(q=0.112、0.597,P0.05)。各年龄组颈长肌肌梭密度均高于头夹肌,差异均有显著意义(t=8.221~12.523,P0.01)。见表1。表1各年龄组标本颈深肌肌梭密度比较2.2不同年龄标本神经节细胞NT3、TrkC表达比较显微镜下各年龄组神经节细胞均可见NT3、TrkC阳性表达,阳性颗粒沉积于胞浆,细胞核无着色。与婴儿组比较,青少年组染色强度高,老年组染色强度低,差异有显著意义(F=53.32、141

8、.99,q=3.507~23.663,P0.01)。见表2。各组NT3、TrkC表达特点:婴儿组内可见NT3、TrkC广泛阳性表达,神经节细胞无论大小均可见阳性表达,表达强度较强,表达范围广;青少年组中可见NT3、TrkC阳性表达集中于大中型节细胞,表达强度增强;老年组中可见NT3、TrkC阳性表达位于大中型节细胞,阳性表达较弱。表2各组NT3、TrkC阳性表达比较3讨论正常人体颈椎的平衡稳定由静力平衡和动力平衡两大

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