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《雌激素替代治疗对小鼠胰岛素敏感性的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、雌激素替代治疗对小鼠胰岛素敏感性的作用 2008年世界卫生组织调查报告，全世界已有超过5亿肥胖人群，且肥胖的增长速度显着增加。肥胖易引起代谢紊乱，是2型糖尿病、冠心病、癌症等多种疾病的独立危险因素[1].与男性相比，绝经前女性代谢紊乱发生较少[2-4],但绝经后肥胖、2型糖尿病、冠心病等代谢疾病发生率显着升高[5].研究显示，雌激素替代治疗可以明显改善绝经后女性胰岛素敏感性，降低2型糖尿病发生率[6-8].然而，雌激素的保护作用是通过减轻体重、从而改善代谢状态，还是雌激素的直接保护效应，仍有待
2、进一步阐明。本研究观察了雌激素替代治疗对小鼠胰岛素敏感性的影响及其机制。 材料和方法 实验动物及分组6周龄C57BL/6J雌性小鼠36只，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，清洁级标准饲养，采用随机数字表法随机分为正常饮食组（NOR）、正常饮食去卵巢组（NOR+OVX）、正常饮食去卵巢雌激素替代组（NOR+OVX+E2）、高脂饮食组（HF）、高脂饮食去卵巢组（HF+OVX）和高脂饮食去卵巢雌激素替代组（HF+OVX+E2）6组，每组6只。 动物模型建立随机选取24只6周龄小鼠腹腔注射1%
3、戊巴比妥钠麻醉（40~85mg/kg体重）,行双侧卵巢切除术，另12只小鼠麻醉后行假手术。卵巢切除术后5d起行阴道脱落细胞涂片，连续5d均未出现角化细胞为手术成功。之后将卵巢切除小鼠随机分为两组，一组给予高脂饮食（45%脂肪）,另一组仍为正常饮食；假手术小鼠分为两组，分别给予高脂饮食和正常饮食。喂养20周后，从卵巢切除小鼠中随机选取6只高脂饮食小鼠和6只正常饮食小鼠，给予苯甲酸雌二醇（天津金耀氨基酸有限公司）替代治疗（5μg/d,皮下注射）20d,其余小鼠给予等剂量橄榄油。每3d监测并记录
4、1次体重。 口服葡萄糖耐量试验小鼠禁食4h后，给予0.4g/ml葡萄糖溶液（0.05ml/10g）灌胃，尾静脉取血10μl,时间依次为服糖前，糖负荷后30、60、120min,葡萄糖氧化酶法检测血糖值，计算血糖曲线下面积。 高胰岛素正常葡萄糖钳夹试验1%戊巴比妥钠麻醉（40~85mg/kg体重）,行右侧颈静脉插管，一次性注入50U/ml肝素钠溶液0.05ml,使全身肝素化抗凝；将小鼠固定于恒温平板上，稳定20min;人正规胰岛素以2μl/min速度持续输注，使内源性胰岛素分泌受到
5、抑制；每5~10min尾静脉取血，快速测血糖，根据血糖值调节葡萄糖输注率，以保持小鼠血糖稳定在（5.5±0.5）mmol/L.当钳夹进入稳定状态，取钳夹后80min葡萄糖输注率的均值。小鼠在钳夹结束后断头处死，留取腹腔内脏脂肪，称重。 瘦素、脂联素、抵抗素测定取小鼠血清，采用酶联免疫吸附法试剂盒（ELISA,RD,美国）,按照试剂盒说明书操作步骤分别检测血清瘦素、脂联素、抵抗素。 统计学处理采用SPSS17.0统计软件，符合正态分布的计量资料以均数±标准误表示，各
6、组数据比较前先进行正态分布检验和方差齐性检验，符合正态分布和方差齐性时，多组比较采用单因素方差分析，并进行两两比较；不满足时采用非参数检验；P<0.05为差异有统计学意义。共2页:12 结果 小鼠体重及腹腔内脏脂肪重量变化高脂饮食喂养20周的HF组小鼠体重明显高于NOR组[（37.87±0.87）g比（26.17±0.65）g,P=0.000];而HF+OVX组小鼠又明显高于HF组[（48.38±0.66）g比（37.87±0.8
7、7）g,P=0.000];雌激素治疗20d后，HF+OVX+E2组小鼠体重较HF+OVX组明显降低[（39.82±1.34）g比（48.38±0.66）g,P=0.000]. NOR组、NOR+OVX组和NOR+OVX+E2组小鼠的体重分别为（26.17±0.65）、（27.67±0.33）和（27.00±0.17）g,各组间差异无统计学意义（P=0.079）.HF组小鼠腹腔内脏脂肪重量明显高于NOR组[（2.17&plus
8、mn;0.12）g比（0.50±0.06）g,P=0.000],HF+OVX组小鼠又明显高于HF组[（3.71±0.08）g比（2.17±0.12）g,P=0.000],HF+OVX+E2组小鼠则较HF+OVX组明显降低[（2.01±0.27）g比（3.71±0.08）g,P=0.000].NOR组、NOR+OVX组和NOR+OVX+E2组小鼠的内脏脂肪组织重量分别为（0.50±0.06）、（0.56&plusm
