浊度法测定12-去羟基阿奇霉素效价

《浊度法测定12-去羟基阿奇霉素效价》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、浊度法测定12-去羟基阿奇霉素效价【摘要】目的建立浊度法测定12．去羟基阿奇霉素效价的方法。方法以肺炎克雷伯菌为试验菌，加菌量0．6%~1．0%(V/V)，37℃±0．5℃培养4h左右测定。结果抗生素线性浓度为2．0~10．0U/ml，二剂量法原料的平均回收率为101．2%，RSD为2．2%(n=9)。结论本方法灵敏，快速，影响因素较少，可作为测定12．去羟基阿奇霉素的效价的方法。【关键词】效价；浊度法；12．去羟基阿奇霉素ContentdeterminationofDihydroxylAzithromycinbyturbidimetricmethodJIANGJ

2、ian．guo，GAOQing．li，GAOYan．xia.TheInstituteforDrugControlofHebeiProvince，Shijiazhuang050011,China【Abstract】ObjectiveToestablishaturbidimetricmethodforthecontentdeterminationofDihydroxylAzithromycin.MethodsThetestorganismwasKlebosiellaPneumociacandculturedwithfreshmedium(pH7．8).Adjustsp

3、oresuspensionofKlebosiellaPneumociaciinoculatewitha0．6%．1．0%(V/V)ratio，at37℃±0．5℃forabout4h.ResultsThelinerrange7was2．10U/ml.TheaveragerecoveryofFosfomyminCalciumCapsuleswas101．2%(RSD=2．2%，n=9).ConclusionThemethodissensitive，rapidandfeasibletodetermineDihydroxylAzithromycin.【Keywords】

4、Potency;Turbidimetricmethod;DihydroxylAzithromycin12-去羟基阿奇霉素是由红霉素C为原料，通过化学合成的方法合成的。本药物属广谱抗菌药，对大多数革兰阴性细菌以及细胞内病原菌、支原体和衣原体等有较好的抗菌活性，对革兰氏阳性细菌也有一定的抗菌活性。其抗菌活性较阿奇霉素为强。本药物属于新药，目前尚无含量测定方法。本文建立了浊度法测定12．去羟基阿奇霉素效价的方法。通过对12．去羟基阿奇霉素用比浊法测定其效价的研究，即可直观反应药物的抗菌活力，又可在检测当天获得实验结果。1仪器与试剂CBZ．1抗生素光度比浊法测量仪、石英培

5、养杯(厚度1cm)，北京潮声公司。肺炎克雷伯菌(Escherichiacoli)［CMCC(B)44103］，由中国药品生物制品检定所提供。阿奇霉素标准品(批号：130352．200405含量：9367U/mg)由中国药品生物制品检定所提供。12．去羟基阿奇霉素(河北省药品检验所自主合成)。抗生素检定培养基Ⅲ号(pH7．8，批号060403)由北京三药科技开发公司提供(中国药品生物制品检定所监制)；灭菌0．9%氯化钠溶液和磷酸盐缓冲溶液(pH7．8)均按中国药典2005年版二部附录配制。2方法与结果2．1一剂量法2．1．1菌液的配制取肺炎克雷伯菌的营养琼脂斜面培养

6、物，接种于营养琼脂斜面上，在35℃~37℃培养18~22h，临用时，用0．9%灭菌氯化钠溶液洗下；取新鲜的菌悬液适量，加12%甲醛液1ml杀灭，加生理盐水做适当的稀释，使得其在580nm波长处的吸收值为1．0，记录其稀释所用的生理盐水的毫升数和1ml12%甲醛液的总毫升数，再将原菌液按此比例稀释，即为试验菌液。取试验菌液0．6~1．0ml加至培养基100ml中，摇匀，为实验菌液。2．1．2溶液的配制标准品溶液取阿奇霉素标准品适量，精密称取，加乙醇溶解并用水稀释成1000μg/ml的溶液，作为储备液备用；精密量取储备液适量，用磷酸盐缓冲溶液(pH7．8)进一步稀释成

7、2、4、5、8、10U/ml的标准品溶液。2．1．3培养与测定取标准品溶液1．0ml，加入灭菌培养管中，再加入实验菌液9．07ml，置抗生素比浊法测量仪内，于37℃培养。另取稀释溶剂1．0ml，加空白培养基9．0ml，混匀，作为空白对照，仪器在线于530nm的波长处测定各管肺炎克雷伯菌对数生长期内不同培养时间下的吸光度值(A)。根据量反应平行线原理计算供试品的效价值。2．2二剂量法2．2．1溶液的配制①标准品溶液精密量取阿奇霉素标准品储备液适量，用磷酸盐缓冲溶液(pH7．8)稀释制成4．0U/ml和8．0U/ml的标准品溶液;②供试品溶液取12．去羟基阿奇霉素适量

8、，加乙醇溶