线栓法建立兔局灶性脑缺血再灌注模型研究

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1、线栓法建立兔局灶性脑缺血再灌注模型研究：刘学军孔令琦隋庆兰金丽英刘广义郭云良唐建德【关键词】线栓［摘要］目的探讨影响线栓法制作兔大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注模型成功率的因素及其解决方法。方法成年健康新西兰兔103只，随机分为A组53和B组50只，每组再按体质量大小分3个亚组，A组应用同一标准头径的线栓，B组对应体质量不同而分别使用不同头径的线栓，比较A、B两组制作缺血再灌注模型的成功率。不成功的动物模型开颅取脑观察，并分析失败原因及其影响因素。结果A组成功率（49.1%）明显低于B组（74.0％），差异有显著性（χ2=11.59，P<0.01）；46只不成功缺血再灌注模

2、型中，插线过深者26只，占56.5%；插线深度不足者20只，占43.5%。结论针对动物不同的体质量而选择相应大小头径的线栓，可获得较高的缺血再灌注模型制作成功率；插线过深及深度不足为缺血再灌注模型制作失败的主要原因。［关键词］脑缺血；再灌注损伤；兔；动物模型［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigateakingfocalcerebralischemiaandreperfusionbyintraluminalthreadtechniqueinrabbits.MethodsNelydividedintotediameterofthreadtipeterofthre

3、adtipakingthemodelsodelsong46unsuccessfulmodels,26provedinmakingischemiamodels.Overorinsufficientinsertionofthethreadaremonreasonsforthefailureinmodels.［KEYRS）等新技术的迅速发展，可从影像学上对急性缺血性脑卒中的血流动力学、缺血区分子扩散及代谢情况进行较详细的描述。建立操作简便、稳定、可靠、重复性好的局灶性脑缺血再灌注动物模型，是进行这些研究的实验基础。目前，线栓法制作大脑中动脉闭塞再灌注（MCAOR）模型方法已被广泛而成功

4、地应用于大鼠，而在制作兔MCAO模型的应用中仍相对较少［1~6］，仍然存在一些问题。本研究旨在探讨影响线栓法制作兔MCAOR模型成功率的因素及解决方法。现将结果报告如下。1材料与方法1.1动物及分组选择新西兰兔103只，雌雄不限，体质量1.8~3.3kg，健康状况良好，由山东省农业科学院实验动物中心提供。随机分为A组53只，B组50只。A组按体质量大小分为A1组13只，1.8~2.3kg；A2组31只，2.4~2.8kg；A3组9只，2.9~3.3kg。A组动物均使用标准头径（0.51～0.55mm）的线栓。B组亦按其体质量大小分为B1组12只，1.8~2.3kg；B2组29只，

5、2.4~2.8kg；B3组9只，2.9~3.3kg。B3~B3组按体质量大小分别对应使用不同头径的线栓，B1组0.46~0.50mm，B2组0.51~0.55mm，B3组0.56~0.60mm。1.2线栓制作将3号尼龙线（直径0.285mm）剪成10cm长的线段，在距线段的一端0.5~1.0cm处，均匀涂上硅橡胶，直到线栓头端直径及形态达到所需要求，并在距离线栓头端6.0cm处做标记。线栓头端直径用千分尺测量并控制在0.45~0.60mm范围内，根据文献将0.51~0.55mm作为标准线栓头径［7］。制备线栓应在实验前2~3d进行，以保证线栓在使用前能充分晾干固定。1.3模型制作

6、动物称质量后，自耳缘静脉缓慢注射20g/L的乌拉坦（5mL/kg体质量）麻醉，常规消毒，无菌操作，颈部正中切口，充分暴露左侧颈总动脉（CCA）及颈动脉分叉，并向头侧小心分离出近段颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA）。在ECA发出第一分支前结扎ECA，动脉夹暂时夹闭CCA和ICA，于ECA结扎处的近端将其剪断，用镊子钳住其残端并将其反折使之与ICA方向一致。将线栓经ECA残端向ICA内缓缓送入，遇到ICA上的动脉夹时则松开动脉夹继续插线。当线栓进入ICA超过4.0cm且有轻微阻力感不能进线时应停止插线，记录线栓插入深度，并将ECA残端及线栓一同结扎固定，记录时间作为动脉阻塞开始时

7、间［7］。再灌注时，用镊子或血管钳夹住线栓外露残端轻轻向外拉出，直至遇到明显阻力感不能继续时停止牵拉，记录时间作为再灌注开始时间。1.4MR检查采用GESigna1.5T的MR扫描仪，标准头线圈，动物仰卧位置于头线圈中央，在定位相上取视交叉平面为中心层面，行冠状位连续扫描5层，层厚3mm，层间距1mm。扫描序列应用DR检查，DCA，占43.5％。3讨论大脑中动脉（MCA）是人类缺血性卒中的好发部位。兔的颅内主要供血动脉为ICA，颅内外血管间吻合网少，脑内血管分支间的端端吻合发达程