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时间:2018-07-10
《agilent 1100 液相色谱工作站基本操作说明》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、Agilent1100型HPLC操作规程一、开机1、开机前准备:流动相使用前必须过0.45um的滤膜(有机相的流动相必须为色谱纯;水相必须用新鲜注射用水,不能使用超过3天的注射用水,以防止长菌或长藻类);把流动相放入溶剂瓶中。A瓶:为水相;B瓶:为有机相。2、打开电脑,选Windows2000,进入Windows2000界面。3、双击CAGBoodpserver图标,放大CAGBoodpserver小图标,出现窗口,5分钟内打开液相各部件电源开关,等待1100广播信息后,表示通讯成功连接,关闭CAGBoodpserver窗口。4、双击online图标,仪
2、器自检,进入工作站。该页面主要由以下几部分组成:——最上方为命令栏,依次为File,RunControl,Instrumen…等;——命令栏下方为快捷操作图标,如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等;——中部为工作站各部件的工作流程示意图;依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告;——中下部为动态监测信号;——右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。4、从“View”菜单中选择“MethodandControl”画面。二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法:从“Method”
3、菜单中选择“Newmethod”,出现DEF-LC.M,从“Method”菜单中选择“Editentiremethod”,选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项,单击“OK”,进入下一画面。2、方法信息:在“MethodComments”中加入方法的信息,如方法的用途等。单击OK,进入下一画面。3、泵参数设定:进入“Setuppump”画面,在“Flow”处输入流量,如1ml/min;在“SolventB”处输入有机相的比例如70.0,(A=100-B),也可在Insert一行“Timetable”,编辑梯度;输入保留时间;在“
4、PressureLimitsMax”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。单击“OK”,进入下一画面。4、DAD检测器参数设定:进入“DADsignals”画面,输入样品波长及其带宽、参比波长及其带宽(参比波长带宽默认值为100nm);选择Stoptime:asPump;在“Spectrum”中输入采集光谱方式“store”:选All;如只进行正常检测,则可选None;范围Range:可选范围为190~950nm;步长Step可选2.0nm;阀值:选择需要的灯;Peakwidth(Responsetime)即响应值应尽可能接近要测的窄峰峰宽,可选“2s”或
5、4s;Slit-:狭窄缝,光谱分辨率高;宽时,噪音低。可选4nm单击“OK”,进入下一画面。5、进入“SignalDetails”画面,单击“OK”,进入下一画面。6、进入“EditIntegrationEvents”(编辑积分结果)画面,单击“OK”,进入下一画面。7、进入“Specifyreport”(积分参数)画面,单击“OK”,进入下一画面。8、进入“Instrumentcurves”画面,单击“OK”,进入下一画面。9、进入“RunTimechecklist”(运行时间表)画面,选择“DateAcquistition”和“StandardDat
6、eAnalsis”,单击“OK”,完成参数设定,回到工作站画面。10、单击“Method”菜单,选中“Savemethodas”,输入文件名,单击“OK”。(路径:eHPCHEM1methods***)注:如果调用一个方法,则在“Method”菜单,选中“Loadmethod”,选方法名,单击OK。11、从菜单“View”中选择“Onlinesignal”,选中Window1,然后单击Change钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点“OK”。(如同时检测二个信号,则重复11,选中Window2)。三、运行样品1、单击泵(Pump)图标下面的小瓶
7、图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,并且选停泵体积。单击“OK”。2、手动打开Purge阀:逆时针转2~3圈。3、单击泵(Pump)图标,出现参数设定菜单,单击“Setuppump”选项,进入泵编辑画面。设Flow:5ml/min,单击“OK”。4、开泵:直接点“Pump”图标下面的泵开关小图标,或单击“Pump”图标,出现参数设定菜单,单击“Pumpcontrol”选项,选中“On”,单击“OK”。5、系统开始排液(Purge),直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续排液,直到所有通道无气泡为止。(每个管线内液体约20ml,在5ml/mi
8、n的流速下,均需4~5min才能排完)6、单击泵(Pump)图标,出现参数设定菜
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