kernel 喹诺酮说明书(2014-1-7)

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1、广州市瑞品生物技术有限公司Kernel™喹诺酮酶联免疫反应试剂盒说明书(货号：EVFQS-01)1．概述Kernel™喹诺酮酶联免疫反应测试盒是用于检测鸡蛋、鱼/虾、鸡肉/猪肉、牛奶、血清/尿液、蜂蜜等样品中喹诺酮的残留量。该试剂盒特点包括：Ø高回收率（>80%），快速（10-40分钟），多种样品低成本提取方法。Ø高灵敏度（0.3ng/g或ppb）。Ø快速的ELISA检测方法（只需不到90分钟）。Ø高重现性。2．试剂盒原理Kernel™喹诺酮酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有喹诺酮的药物抗原已经包被于微孔板上，在

2、分析时，样品中药物特异性地与抗体相结合。如果药品中有药物存在，它将阻止包被于微孔板上的药物与抗体结合。当与样品药物相结合的药物抗体被洗涤去除后，只剩下与微孔内药物相结合的抗体，与经酶标记物相结合。反应后颜色深度与样品中喹诺酮的含量成反比。3.试剂盒组成部分和储存内容物规格保存喹诺酮包被板96孔板（12×8孔）2-8℃喹诺酮标准品：0ng/ml阴性质控0.3ng/mL1.1ng/mL3.3ng/mL0.8mL0.8mL0.8mL0.8mL0.8mL2-8℃10ng/mL30ng/mL0.8mL回收用1000ng/ml0.8mL

3、200×HRP酶结合物0.1mL2-8℃10×浓缩洗液(WashSolution)50mL2-8℃终止液(StopBuffer)12mL2-8℃TMB底物(TMBSubstrate)12mL2-8℃5地址：广州市海珠区新港东路致远街32号电话：020-898837868923703834094537传真：020-89883786广州市瑞品生物技术有限公司10x样品提取液50ml2-8℃4.样品检测下限检测物质检测下限（ppb）鸡蛋3鱼/虾3鸡肉/猪肉3牛奶1.5血清/尿液1.5蜂蜜65.交叉反应分析物交叉反应(%)恩诺沙星(

4、Enrofloxacin)100环丙沙星(Ciprofloxacin)100沙拉沙星(Sarafloxacin)100二氟沙星(Difloxacin)100诺氟沙星(Norfloxacin)143恶喹酸(Oxolenicacid)112吡哌酸(Pipemidicacid)102氧氟沙星(Ofloxacin)97达氟沙星(Danofloxacin)73氟甲喹（Flumequine）62西诺沙星（Cinoxacin）56．未提供的设备或材料1)酶标仪(450nm)2)匀质器3)漩涡振荡器5地址：广州市海珠区新港东路致远街32号电

5、话：020-898837868923703834094537传真：020-89883786广州市瑞品生物技术有限公司1)微量加样器(10、20、100和1000mL各一支)2)多道枪：50-300mL3)甲醇7.注意事项实验前请阅读以下文字，以保证获得最佳实验效果。1)标准品中含有喹诺酮，请小心使用。2)不要使用过期的试剂盒。3)不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。确保酶结合物及酶结合物稀释液正确配制。4)尽量保持室温（22.5±2.5）°C，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不

6、要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。5)水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。6)加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。7)孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。8)从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。9)将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。8．样品的制备样品保存在2-4℃不超过1-2天，如果需要保存较长的时间，应该放置-20℃。样品使用前应恢复到室温。1×样品提取液

7、：1(10×样品提取液)：9(蒸馏水)35%甲醇/样品提取液混合6.5体积1×样品提取液和3.5体积100%甲醇。举例：取35ml100%甲醇加入到65ml1X样品提取液中，配制成100ml的35%甲醇/样品提取液，按需要，可同比例放大或缩小。70%甲醇按7：3的比例配制无水甲醇和双蒸馏水。举例：取70ml无水甲醇加入到30ml双蒸馏水中，配制成100ml的70%甲醇。按需要，可同比例放大或缩小。鸡蛋（1）称取1g鸡蛋样品，加入4mL的70%甲醇。（2）最大速度涡旋振荡2分钟。（3）室温（22.5±2.5）°C下4000g离

8、心5分钟。（4）移取0.5mL上清液到离心管中，加入0.5mL的1×样品提取液，混匀。（5）取50uL处理好的样品液用于分析。稀释倍数：10.05地址：广州市海珠区新港东路致远街32号电话：020-898837868923703834094537传真：020-89883786广州市瑞品生物