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1、山羊胚胎移植技术在农村牧区的推广论文论文关键词:敏盖绒山羊、同期发情、超数排卵、胚胎移植论文摘要:从农村牧区养殖业的生产实际出发,系统论述了敏盖内蒙古白绒山羊在生产性胚胎移植中的技术程序。主要包括:提前的准备工作：选择适宜的供、受体羊，并加强饲养管理；胚胎移植条件的准备：在适宜的季节,用宁波激素厂促卵泡素（宁波三生激素厂）,以减量法进行供体超排；供、受体比例为1:8～12;用阴道栓配合促性腺激素,或用氯前列烯醇(ＰＧ)进行受体同期发情处理；从供体输卵管手术回收的胚胎,移植于受体羊输卵管；完整的记录体系。胚胎移植是现代生物工程高新技术，能充分发挥优良母畜的繁殖潜力，迅速扩大
2、优良畜群和纯种规模，加速杂交改良速度，缩短改良周期和育种进程，增加双胎率，防止不育.freell注射器、10ml注射器、5ml注射器、1ml注射器、胚胎移植手术架、手术刀片、医用缝合线、体视显微镜、冲胚管、集卵皿、培养皿、消毒卫生纸、医用喷壶、黑色记号笔、宫颈扩张器、移胚器、检胚皿、剪毛剪、外科剪、手术刀、止血钳、创巾钳、持针钳、手术镊、缝合针、创巾、止血纱布、脱脂棉、盆等。2.1.2药品冲胚液、胚胎培养液、冰袋、生理盐水、新洁尔灭洗涤液、碘酊、酒精、青霉素、黄胺粉、FSH、孕马血清、CIDR、阴道海绵栓、氯前列烯醇(PG)、黄体酮、麻醉剂（2％静松灵）、苏醒灵等。2.2
3、胚胎移植操室准备50m2的以上房间,分隔为2个房间，胚胎移植手术室和胚胎操作室。并设置工作台及药械台等。室温保持在22℃-25℃,并用新洁尔灭进行室内消毒。43.供、受体羊的同期发情及供体的超排具体方案如下：日期供体山羊受体山羊0天早8时，放置海绵栓5天早8时，放置阴道海绵栓9天早8时，取出海绵栓、放入一新的海绵栓15天晚6时，肌注PMSG200iu晚6时，肌注PMSG200iu16天晚6时，肌注FSH28-30iu17天早8时，肌注FSH28-30iu晚6时，肌注FSH23-25iu18天早8时，肌注FSH23-25iu晚6时，a、肌注FSH18-20iub、肌注PG0
4、.5ml晚6时、肌注PG0.5ml19天早8时，a、撤出海绵栓（青霉素冲阴道）b、肌注FSH18-20iu晚6时，a、开始试情b、发情后立即静注LH130-140IUc、发情后立即进行输精早8时，撤出阴道海绵栓晚6时，开始试情20天进行手术输精(发情12小时)早8时试情22天输卵管冲胚（建议在下午开始较好）输卵管移植4胚胎回收及胚胎检查4.1供体羊术前准备胚胎回收手术前1天停止饲喂草料而只给少量饮水，否则由于腹压过大，会造成手术的困难和供体生殖器官的损伤。饲喂干草的母羊，停饲的时间不能少于24小时，饲喂青草或在草地上放牧的羊，停饲时间可减少至18个小时。在术前一天术部进行
5、剪毛和剃毛，常有许多剃断的毛粘于皮肤，很难消除干净，手术中易带入创口造成污染，可采用干剪毛湿剃毛，剪毛完毕后用肥皂涂于要剃毛的部位，再用剃毛刀剃毛，然后用干毛刷将断毛刷除干净。第二天进行冲胚手术。4.2供体羊冲胚：供体羊的冲胚手术在授精后68-72小时进行。（采用输卵管冲胚法可获2-8细胞期的胚胎及少量的16细胞期胚胎。用于鲜胚移植。）6首先，对供体羊全身麻醉，术部消毒后,采取前低后高半仰姿势将其保定在手术台上。在腹底部偏右侧距乳房基部3-4cm处做一长4-5cm的纵向切口，逐层切开,切开腹膜后,将中指和食指伸入腹腔在骨盆腔前沿膀胱之下触摸子宫角,把子宫角牵引到切口之外,
6、再把卵巢引出,检查黄体发育情况,如果黄体发育正常，即冲胚。冲胚时，在输卵管伞部前端插入一个带有胶管的回收圆针，并用手卡住，准备收集冲出的胚胎；再向输卵管的壶腹部处,插入装有冲胚液的进液针头,缓慢推入冲胚液，将胚胎冲入器皿中,冲胚液用量30-50ml。一侧冲洗结束时,除去器械,检查针孔,确认无出血现象,将输卵管送回腹腔内,然后按同一操作办法进行另一侧冲胚。两侧冲洗完毕后,将子宫送回腹腔并向腹腔内注入25℃～30℃生理盐水,最后逐层进行缝合。4.3胚胎检查：4.3.1检卵将收集的冲卵液于37℃温箱内静置10-15分钟。胚胎沉底后，移去上层液。取底部少量液体移至平皿内，静置后，
7、在视体显微镜下先在低倍(10-20倍)下检查胚胎数量，然后在较大倍数(50-100倍)下观察胚胎质量。4.3.2吸胚用移植器先吸一段1cm长的保存液，再吸一段0.5cm的空气，然后吸取胚胎。含胚胎的液柱不超过1.5cm。吸胚是为了移取、清洗、处理胚胎，要求目标准确，速度快，带液量少，无丢失。吸胚可用1毫升的注射器装上特别的吸头进行，也可使用自制的吸卵管。4.3.3胚胎质量鉴定正常发育的胚胎，其中细胞(卵裂球)外形整齐，大小一致，分布均匀，外膜完整。无卵裂现象(未受精)和异常卵(外膜破裂、卵裂球破裂等)都不能用于移植。处于二分体
