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1、从菌丝体中制备壳聚糖的研究第23卷第9期2007年9月商丘师范学院JOURNALOFSHANGQIUTEACHERSCOLLEGEV01.23No.9Sep.2007从菌丝体中制备壳聚糖的研究陈淑敏,刘瑛(商丘师范学院化学系,河南商丘476000)摘要:以青霉菌丝体为原料,在碱性溶液中,完成甲壳素的脱乙酰化,然后酸浸的方法把壳聚糖提取出来.利用微波技术,优化了制备工艺.采用NaOH浓度为5%,微波处理时间20min,用2%的乙酸提取3h,可得到收率为2%～3%,纯度为92%的壳低聚糖.关键词:壳聚糖;微波处理;青霉菌丝体中图分类号:0636文献标识码:A文章编号:1672—3
2、600(2007)09—0074～03TheresearchofpreparationofchitosanfromPeniciUillmCHENShu—min,LIUYing(ChemistryDepartment,ShangqiuTeachersCollege,Shangqiu476000,China)Abstract:Chitosanwasextractedfrompenicillium.Chitinwasdeacetylatedinthealkaxidsolution;then,Chitosanwaswithdrawnintheacidsolution.Usingthe
3、microwavetechnology,Technicalprocesswasoptimized.NaOHden—sitywas5%,microwaveprocesstime20min,withdrew3hwith20%ethanoicacid,Theyieldis2%一3%,thepurl—tyis92%.Keywords:chitosan;microwavemethod;Penicillium目前,壳聚糖一般是从虾壳,蟹壳中提取.主要分两步进行,首先,利用虾壳,蟹壳制得甲壳素,然后,将其脱乙酰化.但是由于其生产原料不易收集,且供应随季节变化差异很大,还有壳聚糖的含量较低,
4、再加上生产工艺比较复杂.由于以上原因,从20世纪80年代后期,日本,美国先后开始研究用微生物发酵的方法生产壳聚糖.我国用微生物生产壳聚糖的研究起步较晚,曾经有人从黑曲霉菌丝体中提取壳聚糖.本文是从青霉菌菌丝体中制备壳聚糖,采用反应与分离耦合的方法,应用微波处理技术,降低提取过程中碱的用量,同时降低反应时间,节约了能耗,从而优化了反应工艺路线.1实验部分1.1材料和仪器青霉素菌丝体,华北制药集团倍达公司提供;氢氧化钠,乙酸,均为分析纯;SHA2B型水浴恒温振荡器,金坛市华峰仪器有限公司;TDL252A型离心机,上海安亭科学仪器厂;722型可见分光光度计,上海精密仪器有限公司;P
5、HS一3C酸度计,NDJ—l型旋转粘度计,上海天平仪器厂出品.1.2实验方法实验流程:菌丝体预处理一碱液微波处理一离心洗涤至中性一乙酸提取一离心分离一干燥沉淀物,得白色固体.1.2.1菌丝体预处理用自来水洗涤菌丝体5—10遍,以除去残留的培养基,再用去离子水洗涤2—3遍,以尽可能地除去无机盐.抽滤,取滤饼并将其烘干,再将烘干的菌丝体用粉碎机粉碎,存储备用.1.2.2碱液微波处理甲壳素在浓碱作用下可部分或完全脱去氮原子上的乙酰基,所以此步实验称脱乙酰化.称取一定质量的菌丝体,加入不同浓度的NaOH溶液.设定微波炉温度为80℃…,火力为中高档,工作5s,停止5s.由于微波加热的速
6、度过快,易出现局部过热,样品受损].所以采用加热5S,停止5S的加热方式.收稿日期:2007—05—08作者简介:陈淑敏(1979一),女,河南柘城人,商丘师范学院助教,主要从事无机化学教学与研究第9期陈淑敏,等:从菌丝体中制备壳聚糖的研究751.2.3离心洗涤至中性将微波处理后的菌丝体用去离子水洗涤,离心,至上清液中性.1.2.4乙酸提取将乙酸和已经处理的菌丝体放入烧杯中,用多层保鲜膜覆盖,高温水浴提取.1.2.5离心分离将提取液离心,取上清液,调pH值为8.0—10.0,出现白色絮状沉淀,离心,弃上清液,将沉淀置于105~C烘箱中干燥,得白色固态壳聚糖.1.2.6产品分析
7、(1)用分光光度法测D一氨基葡萄糖的分量.配制一系列标准溶液,用分光光度计在530nm波长处测定各试管中溶液的吸光度值如表1所示.作出标准曲线如图1,得出标准曲线方程Y=100.13X.将所测待测液的吸光度值y代入标准的曲线方程算出对应的值,即为待测液中D一氨基葡萄糖的浓度.比如:准确称取0.05g降解产物置于100ml容量瓶中,加浓盐酸溶解,然后定容成10ml,用上述方法,对降解产物中D一氨基葡萄糖的含量进行测定和分析,则降解产物中D一氨基葡萄糖的含量为X×10/0.05×100%.表1分光光度法测D
