黄芩素治疗子宫内膜异位症的作用研究论文

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1、黄芩素治疗子宫内膜异位症的作用研究论文【摘要】目的观察黄芩素对大鼠子宫内膜异位症防治作用及其机制。方法采用手术移植法制备大鼠子宫内膜异位症模型,大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和黄芩素高、低剂量组,测定大鼠的血清TNFα,IL6,IL8含量及脾脏NK细胞活性,采用免疫组织化学的方法检测异位内膜标本中Bcl2,ICAM1的表达。结果黄芩素治疗组与模型组相比血清TNFα,IL6,IL8活性明显降低.freeletriosisinRatsAbstract:ObjectiveToinvestigatethetherapeuticeffectsan

2、dmechanismofscutellarinonendometriosisinrats.MethodsTheendometriosismodelofratsplantationandratslydividedintofourgroups.Attheendoftheexperiment,theactivitiesofserumTNFα,IL6,IL8munohistochemistryandtheactivityofnaturekillcellinspleeneasured.ResultsTheactivitiesofserumTNFα,IL6,

3、IL8inscutellaringroupsodelcontrolgroup,theexpressionsofBcl2,ICAM1inscutellaringroupsodelcontrolgroup,theactivityofnaturekillcellinspleenofscutellaringroupsrosemoresignificantlythanthatofthemodelcontrolgroup.ConclusionScutellarinmayhavethetherapeuticeffectontheendometriosisofrat

4、sbyinhibitingtheproducingofserumTNFα,IL6,IL8,decreasingtheexpressionsofBcl2,ICAM-1andenhancingtheactivityofnaturekillcellinspleen.Keyetriosis;NKcell;ICAM1子宫内膜异位症(endometriosisEM)是一种常见的妇科疾病,主要指子宫内膜在子宫腔被覆面以外的地方种植生长,是一种具有侵袭性的良性病变。该病的临床表现主要为顽固性的痛经,腹痛及不孕等,成为危害当今育龄妇女健康及生活质量的一种很重要的疾

5、病。EM在育龄妇女中发病率约15%左右,在不孕妇女中高达50%,其发生机制可能与体腔上皮化生学、激素、免疫、环境、遗传学说等因素相关[1,2]。黄酮类化合物是一类低分子的广泛分布于植物界的天然植物成分,具有多方面的生物活性,如:抗炎、抗病毒、抗氧化、抗衰老、免疫调节以及抗肿瘤作用等。黄芩素(scutellarin)是从黄芩中提取的一种黄酮类单体化合物[3]。本实验通过建立大鼠子宫内膜异位症模型后给予黄芩素进行治疗,观察黄芩素对子宫内膜异位症大鼠细胞因子,ICAM1及凋亡相关因素的影响,为探讨子宫内膜异位症的治疗提供理论和实验依据。1材料与方法1.1材料雌

6、性1检测试剂盒:武汉博士德生物技术有限公司;其余为国产分析醇。I125一放免测定仪及FJ2107液体闪烁计数器:西安262厂;ELISA酶标仪:美国BioRed公司2550型。1.2动物模型及分组造模方法[4]:雌性未孕1检测取出的异位内膜新鲜组织,迅速放入液氮低温冷冻固定后,进行连续冰冻切片;室温放置30min后,入4℃丙酮固定10min,PBS洗,5min3次;3%过氧化氢孵育5~10min,清除内源性过氧化物酶的活性;PBS洗,5min×2次;下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤。1.3.6NK细胞活性检测各组大鼠处死后酒精浴,超净台中分别取脾,

7、研磨、分离成单细胞悬液,用完全培养基调整细胞数为5×l06/ml,培养Yac1细胞,于生长旺盛期将细胞离心,调整Yac-1细胞浓度与脾细胞浓度为1∶50,加入到96孔板中,同时分别设脾细胞和Yac1细胞对照孔,5%CO2,37℃培养4h,离心弃上清,每孔加入MTT0.5mg/ml,继续培养4h,1500r/min离心弃上清,每孔加入盐酸异丙醇,充分溶解结晶颗粒,于570nm测定光密度OD值,并计算其杀伤率。计算公式:NK细胞杀伤活性(%)=[1-(实验孔OD一脾细胞对照孔OD)/Yac-1对照孔OD]×100%。1.4统计学方法所有数据用±s表示,组间

8、比较采用t检验处理。2结果2.1病理组织HE染色模型组:异位内膜呈

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