缺血性脑损伤中硝酸甘油对神经元保护及akt信号通路影响

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时间:2018-07-09

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1、缺血性脑损伤中硝酸甘油对神经元保护及Akt信号通路影响【摘要】目的探讨硝酸甘油(NG)对大鼠缺血性脑缺血再灌注中Akt和Bad(ser136)磷酸化的影响。方法36只健康SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(对照组)、硝酸甘油组。以大鼠四肢动脉结扎脑缺血模型为基础,应用焦油紫染色法检测海马CA1区神经元凋亡,采用免疫印迹检测Akt和Bad(ser136)的磷酸化。结果硝酸甘油组脑海马CA1区神经元凋亡显著少于对照组(P<0.05);硝酸甘油组Akt、Bad(ser136)的磷酸化显著高于对照组(P<0.05)。结论硝酸甘油能显著减轻脑缺血再灌注后

2、脑海马CA1区神经元凋亡,明显提高Akt、Bad(ser136)的磷酸化水平,对脑缺血再灌注损伤起到保护作用。【关键词】脑缺血;硝酸甘油;海马;AktProtectionofnitroglycerineonneuronsandeffectonAktsignalingpathwayduringischemiccerebralstrokeinratsZHANGFang,LIUHong-zhi.SchoolofBasicMedicalScience,XuzhouMedicalCollege,Xuzhou,Jiangsu,221004,China【Abstract】ObjectiveTo

3、investigatetheeffectofNGonthephosphorylationofAktandBad(ser136)7duringischemiccerebralstrokeinrats.Methods36AdultmaleSD(Sprague-Dawley)ratswererandomlydividedintosham-operatedgroup,ischemia-reperfusiongroup(controlgroup),NGopenertreatmentgroup(NGgroup).Basingonthefour-vesselocclusionmodels,ne

4、uronapoptosisinCA1regionofhippocampuswasdetectedbycresylvioletstaining,thephosphorylationofAktandBad(ser136)weredetectedbyimmunoblotting.ResultsThenumberofapoptoticneuronsinNGgroupweresignificantlymorethanthatofcontrolgroup(P<0.05).ThephosphorylationofAktandBad(ser136)inNGgroupwassignificantl

5、ylessthanthatincontrolgroup(P<0.05).ConclusionNitricoxidedonorNGhasaprotectiveeffectonneuroninCA1regionofhippocampusfollowingcerebralischemia-reperfusionbysignificantlyincreasingthephosphorylationofAktandBad(ser136)andneuronalapoptosis.【Keywords】Cerebralischemia;Nitroglycerine;Hippocampus;Akt

6、一氧化氮(nitric7oxide,NO)是非经典神经递质和细胞功能调节因子,它维持神经系统的正常功能和对缺血性脑损伤的保护作用日益受到关注,但具体机制不十分清楚。本实验通过观察NO的供体硝酸甘油(nitroglycerine,NG)对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡及Akt和Bad(ser136)磷酸化的影响,以探讨其脑保护作用机制。1材料和方法1.1实验动物分组健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠36只,体质量250~300g,清洁级。大鼠被随机分为两组,缺血15min再灌5d为甲组,再灌12h为乙组。各组又分为假手术组、缺血再灌注组(对照组)、硝酸甘油组,各6只。甲

7、组用于海马CA1区神经元凋亡检测,乙组用于Akt和Bad(ser136)磷酸化测定。1.2动物模型制备及给药方式用20%水合氯醛(300~350mg/kg)腹腔注射麻醉动物后,参照宋远见等[1]实验分离双侧颈总动脉并电凝椎动脉。手术第2天于动物清醒状态下结扎双侧颈总动脉,使全脑缺血15min,然后再灌注不同的时间,缺血时保持其直肠温度在36.5℃~37.5℃,以缺血动物体征表现判断缺血模型的可靠性。假手术组的处理同实验组,但不结扎双侧颈总动脉。硝酸甘油组于缺血前20min给药,腹

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