乌司他丁复合氧氟沙星对大鼠肠黏膜二胺氧化酶的影响

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1、乌司他丁复合氧氟沙星对大鼠肠黏膜二胺氧化酶的影响:张福清,陈国忠,吴晓智,刘韧,聂海贵【摘要】  目的通过检测大鼠肠黏膜中的二胺氧化酶(DAO),来评价乌司他丁复合氧氟沙星对脓毒症大鼠肠黏膜的保护作用。方法脓毒症大鼠80只,随机均分为四组:空白对照组(C组)、氧氟沙星组(O组)、乌司他丁组(U组)和氧氟沙星加乌司他丁组(O+U组),每组再分为12h和24h两组。O组给予氧氟沙星8mg/kg,U组给予乌司他丁15×104U/kg,O+U组则同时给予氧氟沙星8mg/kg和乌司他丁15×104U/kg,2次/d,连续2d,C组给予生理盐水4ml/kg作为对照。在治疗后24h和48h取大鼠肠组

2、织检测DAO,观察肠黏膜DAO的变化情况。结果肠组织DAO在治疗组中均明显升高,O组、U组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05),O+U组与C组比较差异有显著统计学意义(P<0.01),O+U组与O组、U组比较差异有统计学意义(P<0.05),O组与U组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论乌司他丁能保护肠黏膜的屏障功能,增加肠黏膜中DAO的活性,与抗感染药物合用效果更为明显。【关键词】乌司他丁;氧氟沙星;脓毒症;肠黏膜;二胺氧化酶  Abstract:ObjectiveToevaluatetheprotectionofulinastatinbinedineo

3、xidase(DAO)ofintestinalmucosainpyemicrats.MethodsAtotalof80septicratslydividedintofoursetsequally:controlgroup(GroupC),ofloxacingroup(GroupO),ulinastatingroup(GroupU),andofloxacinandulinastatingroup[Group(O+U)],eachofg/kginGroupO,ulinastating/kgandulinastatinetimeinGroup(O+U)talsalinel/kginGroup

4、C.Rats’intestinalmucosalsamplesentinorderthatthevariationofDAOoresignificantdifferencebetore,thereucosa,andtoincreasetheactivityofDAOinintestinalmucosa.Theeffectucosa;diamineoxidase二胺氧化酶(DAO)是人类和哺乳动物小肠黏膜上层绒毛中具有高度活性的细胞内酶,其活性与黏膜细胞的核酸和蛋白合成密切相关,可反映小肠黏膜的完整性和损伤程度。乌司他丁(ulinastatin,UTI)是从人尿中提取精制的一种糖蛋白水解

5、酶抑制剂,它能抑制多种酶的活性[1]。本研究采用公认的脓毒症动物模型—大鼠盲肠结扎穿孔模型(CLP),对大鼠肠组织中的二胺氧化酶进行检测,通过观察乌司他丁对肠黏膜组织中DAO的影响来明确乌司他丁对肠黏膜是否有保护作用。  1材料与方法  1.1动物模型的制备与分组  由中国科学院上海实验动物中心提供的清洁级雄性近交系F344大鼠,体重210~280g,共80只,采用经典盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症大鼠模型,将80只大鼠随机分为4组:空白对照组(C组,n=20),氧氟沙星组(O组,n=20),乌司他丁组(U组,n=20),氧氟沙星+乌司他丁组(O+U组,n=20),每组再分为12h

6、和24h两组。各治疗组在制模6h后开始腹腔注射给药,2次/d,氧氟沙星组给予氧氟沙星8mg/kg,乌司他丁组给予乌司他丁15×104U/kg(UTI批号20061203广东天普生物化学制药有限公司生产),氧氟沙星+乌司他丁组给予氧氟沙星8mg/kg和乌司他丁15×104U/kg,空白对照组腹腔注射生理盐水4ml/kg。  1.2主要试剂  二胺氧化酶(DAO)试剂盒,美国Sigma公司;10%水合氯醛,福州总院药剂科。其余试剂均为国产或进口分析纯。  1.3测定指标  各组动物在制模成功后经过治疗24h和48h后,分别在水合氯醛麻醉状态下,消毒后打开腹腔,取大鼠回肠组织标本检测DAO。

7、将回肠组织从液氮中取出,称取200mg置于匀浆器中,加入7倍体积磷酸盐缓冲液(0.1mol,pH=7.2),冰浴匀浆后离心(10000×g,30min,4℃),取匀浆上清液测DAO活性。采用黎君友等[2]建立的改良DAO测定法(改良分光光度法)测定回肠组织DAO活性。严格按照试剂盒使用说明书进行操作。  1.4统计学方法  采用SPSS12.0统计软件进行统计学处理,将所有的计量资料以均数±标准差(x±s)表示,同一时间点内治疗组和对照组结果的

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