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1、S区和C区小干扰RNA在小鼠体内抗乙型肝炎病毒的作用第35卷第4期2007年8月广州医学院ACADEMICJOURNALOFGUANGZHOUMEDICALCOUJEGEV01.35No.4Aug.2O07S区和C区小干扰RNA在小鼠体内抗乙型肝炎病毒的作用应若素范学工唐小平朱才李宁(广州市第八人民医院感染病科,广州510060;中南大学湘雅医院感染病科,长沙410008;景德镇市第一人民医院感染病科,景德镇333000)摘要目的:以乙型肝炎病毒(HBV)S区和c区为靶住,观察小干扰RNA(siRNA)在小鼠体内抗HBV的作用.方法:以流体动力学法建立HBV感染的动物模型,将peDNA3.1一
2、HBV和细胞体外实验证明有效的S区和c区siRNA尾静脉注射BALB/c小鼠,用时间分辨免疫荧光分析法(IFMA)检测小鼠血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg),用定量PCR法(FQ—PCR)检测血清HBVDNA,用RT-PCR法检测HBVS.mRNA和C—mRNA.结果:在小鼠体内,和无关siRNA相比,s区和c区siRNA均能有效抑制血清中HBsAg的分泌(第l天的抑制率分别为96%和9o%),降低HBVDNA的滴度(第l天分别减少47%和7l%),HBVS.mRNA和C—mRNA的条带灰度明显减少,干扰效果至少持续3d.结论:在小鼠体内靶向HBVS区和c区的siRNA均能有效特异抑制HBV
3、.关键词小干扰RNA;乙型肝炎病毒;动力学;动物模型中图分类号R512.62文献标识码:A文章编号:1008—1836(2007)04—0005—04InhibitionofHepatitisBVirusReplicationRNAinMiceTargetingSGeneRegionandandExpressionbySmallInterferingCGeneRegionYINGRuo一$1Z'FANXue-gong2,TangXiao-ping,ZHUCai,LINing2(DepartmentofInfectionsDiseases,TheNo.8MunicipalPeople'sHosp
4、ital,Guangzhou510060;DepartmentofInfectionsl~ileases,XiangyaHospital,CentralSouthUniversity,Changsha410008;DepartmentofInfectionsDiseases,FirstMunicipalPeople'sHospital,Jingdezhen333000)AbstractObjective:ToevaluatetheinhibitoryeffectofthesmallinterferingRNA(siRNA)onhepatitisBvirus(HBV)inmicewhichtar
5、getsHBVSandCgeneregions.Methods:AnimalmodelofHBVinfectionWasdevelopedhydrodynamicallybyinjectingpcDNA3.1一HBVandsiRNAthroughthecaudalveinofBALB/c.HBsAgWasanalyzedbytime—resolvedimmunofluorometricassay,HBVDNAbyfluorogenicquantitativePCR(FQ—PCR),andHBVS-mRNAandC—mRNAbysemi-quantitativeRT—PCR.Results:In
6、mice,theS-siRNAandC-siRNAwereshowntoinhibit96%and90%ofHBsAgproduction,andreducethetitersofHBVDNAby47%and71%,respectively,onday1.ThegrayscalesofS-mRNAandC—mRNAbandsweremarkedlydecreased.Suchinhibitoryeffectsremaineddetectableforatleast3days.Conclusion:TheseresultsdemonstratethatthesiRNAstargetingHBVS
7、andCgeneregionsCansubstantiallyandspecificallyinhibitHBVreplicationandexpressioninmice.KeywordssmallinterferingRNA;hepatitisBvirus;kinetics;animalmodel乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染是一个全球性的健康问题,对乙型肝炎治疗的
