何首乌对老龄大鼠免疫功能的影响论文

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1、何首乌对老龄大鼠免疫功能的影响论文熊平源王强郭凯文唐朝晖白惠卿【摘要】目的：了解何首乌对老龄大鼠免疫功能的影响。方法：采用溶血素测定法检测何首乌对老龄大鼠溶血素抗体产生的影响；参照LDH法检测何首乌对老龄大鼠NK细胞活性的影响；采用3HTdR掺入法检测何首乌对老龄大鼠淋巴细胞增殖活性的影响；采用姬姆萨染色法检测老龄大鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。结果：药物实验组与老龄对照组比较，溶血素抗体产生水平明显增加(P0.01)；NK细胞的细胞毒活性明显增强(P0.01)；T、B淋巴细胞的转化增殖活性增强（P0.05；P0.01）；腹腔巨噬细胞吞噬功能也明显

2、增强。结论：何首乌能增强老龄大鼠的免疫功能。【关键词】何首乌；溶血素抗体；NK细胞；淋巴细胞；腹腔巨噬细胞现代医学认为，何首乌（TuberFleecefloan公司产品；DG3022型酶联免疫测定仪，华东电子管厂产品；CO2培养箱，美国NaPCo.产品；DYQIII型微量多头细胞收集器，绍兴医疗器械厂产品。2方法与结果21何首乌对老龄大鼠体液免疫功能的影响采用溶血素测定法［3］。取2×108个/mL绵羊红细胞，按每只鼠0.5mL腹腔注射,免疫4d后,将小鼠处死,摘除小鼠眼球,将每只小鼠血分别滴至小试管内,室温放置1h,使血清充分渗出后离心,上

3、层血清用生理盐水稀释后取1mL,再加入0.5mL绵羊红细胞，置冰浴中冷却，加入1mL补体,离心，取上清液1mL及3mL都氏度剂,震荡均匀，放置10min，于540nm波长下比色，测定样品及绵羊红细胞半数溶血时的OD540值。结果见图1。图1何首乌对老龄大鼠溶血素抗体的影响（略）图1结果显示，老年对照（OM）组与青年对照(YC)组比较，抗体产生水平明显低下(P0.05)；而药物实验组与老龄对照组比较,则抗体产生水平明显增加(P0.01)。22NK细胞活性测定参照LDH法，取脾细胞悬液（2×107/mL）0.25mL作为效应细胞,.freelL）0

4、.05mL于96孔培养板中，,使效靶比为50∶1。同时设效应细胞和靶细胞对照,每份样品设3个复孔,置37℃5%CO2培养箱中培养6h。加入3HTdR0.5μCi/孔，培养6h后收获，置于液体闪烁仪中测cpm值［4，5］。结果见图2。图2何首乌对老龄大鼠NK细胞活性的影响（略）图2结果显示，老年对照（OM）组与青年对照(YC)组比较，NK细胞活性明显低下(P0.05)；而药物实验组与老龄对照组比较,则NK细胞活性明显增强(P0.01)。23何首乌对老龄大鼠脾细胞增殖的影响无菌取大鼠脾细胞,洗涤两次,用含10%小牛血清的IMDM培养液调细胞浓度至

5、5×106/mL,加入96孔培养板每孔100μL。然后分别加入ConA和LPS100μL（每份样品设3个复孔），置CO2孵箱培养68h，培养结束前8h掺入3HTdR2.85μBq/孔,收获细胞,测定闪烁值［6］。图3何首乌对老龄大鼠脾细胞增殖活性的影响（略）图3结果显示,何首乌能增加老龄大鼠脾细胞对ConA和LPS的增殖活性,说明何首乌对老年大鼠T淋巴细胞和B淋巴细胞的转化增殖有促进作用。其中药物实验组对ConA的增殖活性，与老年对照组比较P0.01；而药物实验组对LPS的增殖活性，与老年对照组比较P0.05。24何首乌对老龄大鼠腹腔巨噬细胞

6、吞噬功能的影响实验前3天，腹腔注射2%糖原2mL作为巨噬细胞诱导剂。测时脱颈椎处死小鼠，用pH6.5~pH6.7的无钙镁Hank′s液2mL洗出全部腹腔巨噬细胞，取1mL腹腔洗液置于5mL离心管中，加入10%鸡红细胞0.2mL，插入5×20mm2盖玻片条，经37℃30min后取出，洗涤，固定，姬姆萨染色，油镜下计数巨噬细胞吞噬百分率，并计算其吞噬指数［7］。结果见表1。表1何首乌对老龄大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响（略）注：*与青年对照组比较，P0.001；**与老年对照组比较，P0.01。表1结果显示，与青年对照组比较，老年对照组腹腔巨噬细胞吞

7、噬功能明显低下(P0.001)；与老年对照组比较，药物实验组腹腔巨噬细胞吞噬功能明显增强(P0.01)。3讨论免疫衰老状态下的机体，脾淋巴细胞过度凋亡，其免疫应答功能下降、细胞因子水平低下、免疫监视功能减退。有报道提示，随着衰老，每一种细胞因子不同分泌量的变化都对免疫衰老进程有不同影响，如Th1类细胞因子减少，Th2类细胞因子分泌增多，伴随着这种Th1/Th2的不平衡可显著刺激Th3呈高分泌状态，导致机体的抗免疫衰老机制受到严重干扰［2］。衰老状态下，B细胞的成熟过程明显减慢，成熟周期延长，其各亚型的活力不同程度下降，产生抗体的能力及免疫应答反应

8、亦随增龄而降低；老年机体胸腺细胞数减少，T细胞增殖力也低下，在T细胞亚群中，胸腺细胞毒型T细胞（CTL）的免疫杀伤活性明显下降，对同种细