大肠杆菌、菌落总数检测步骤

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1、大肠杆菌及菌落总数检测方法为了对鸡精产品的微生物指标进行有效的控制，对微生物的检测就显的十分重要。下面是鸡精产品的大肠杆菌及菌落总数实验检测方法。一、大肠杆菌：1）培养基准备（以3.5g乳糖胆盐发酵琼脂为例）双料试管配制A、用量杯量取加热的100ML蒸馏水（实验前需对蒸馏水进行高压灭菌处理，处理方法详见注一）。B、用0.1g称量天平秤取7g乳糖。C、将A、B混合均匀，并用10ml吸管各取10ml混合液分别注入三根装有小导管的试管中（此三根为双料试管，即双倍原料）。单料试管配制A、用量杯量取加热的100ML蒸馏水（实验前需对蒸馏水进行高压灭菌处理，处理方法详见注一）。B、用0.1g称量天平秤取3

2、.5g乳糖。C、将A、B混合均匀，并用10ml吸管各取10ml混合液分别注入六根装有小导管的试管中（此六根为单料试管，即单倍原料）。2）将配制好的试管放入灭菌锅进行115℃进行灭菌10min。2）将灭菌过后的试管放置在无菌室，常温保存一周。3）若要对生产的样品检测其大肠杆菌，其步骤如下：A、量取灭菌后的蒸馏水225ml加温后与25g样品混合均匀。（样品需要在无菌室中，有封盖的塑料杯中进行混合）B、取三个玻璃培养皿，分别标上-1、-2、-3标记。C、取两根新试管取9ml蒸馏水分别标为a、b。D、用吸管吸取1ml样品液体，注入-1培养皿中，并盖上盖子。E、用吸管吸取1ml样品液体，注入a试管中，记

3、为-2培养基液。F、用吸管吸取1mla试管中的液体，注入到b试管中，记为-3培养基液。G、用1ml吸管取样品液体分别注入3根单料试管中，用10ml吸管取样品液体分别注入双料试管中H、用1ml吸管取-2培养试管液体，分别注入到单料试管中。I、装好液体的试管，用试管塞封好，放到36℃±1℃的恒温培养箱中24小时培养。J、24小时培养后，取出并用肉眼观察试管的颜色及冒气泡情况，若有其中的任意状况，说明有大肠杆菌，需要通过美兰做进一步的检测。二、菌落总数的测定1、取平板计数琼脂23.5g与100ml灭菌后的蒸馏水混合均匀。1、分别取15ml平板琼脂液到-1、-2、-3培养皿中，待培养皿液体凝固后将培养

4、皿放入36℃±1℃的恒温培养箱中培养48小时。2、取出培养皿，用肉眼计数菌落总数。实验基本完成。注一：蒸馏水在高温灭菌121℃情况下进行30min灭菌。