尤曼桉叶总黄酮的测定方法和品质鉴别研究论文

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1、尤曼桉叶总黄酮的测定方法和品质鉴别研究论文【摘要】目的研究尤曼桉叶总黄酮的测定方法和品质鉴别方法。方法用紫外分光光度法、三氯化铝比色法、硝酸铝比色法对四川引种的尤曼桉叶总黄酮进行测定并和高效液相色谱法测定结果进行比较。结果引种的尤曼桉存在叶片甲醇提取液A259/A364≈1.71和A259/A364≈2.34的两种品质不同的植株，经液相色谱分析其芦丁含量和化学成分有明显区别。A259/A364≈1.71的植株4种方法测定结果差异不大，而A259/A364≈2.34的植株硝酸铝比色法的测定结果分别高出高效液相色谱法和三氯化铝法46.4%，39.9%。

2、结论A259/A364≈2.34植株可能含有干扰硝酸铝比色法的成分。三氯化铝比色法测定尤曼桉叶总黄酮优于紫外分光光度法和硝酸铝法；采用热水提取、紫外分光法和高效液相色谱能很容易地将两类植株的叶片鉴别。【关键词】尤曼桉叶；黄酮；测定方法；品质鉴别StudyonDeterminationMethodsofTotalFlavonoidsandQualityIdentificationaboutEucalyptusyoumaniiLeavesAbstract：ObjectiveTostudythedeterminationmethodsoftotalfla

3、vonoidsandqualityidentificationaboutEucalyptusyoumaniileaves.MethodsThecontentoftotalflavonoidsinleavesofEucalyptusyoumaniietricmethod,AlCl3colorimetricmethod,Al(NO3)3colorimetricmethodandHPLC.parisonsofthefourmethodsicalponentsinleavesbymethanolinationresultsamongthefourmetho

4、dsinleaves(A259/A364≈1.71)hadnoobviousdifferencebuttheresultsbyAl(NO3)3colorimetricmethodinleaves(A259/A364≈2.34)etricmethod.ConclusionThetrees(A259/A364≈2.34)arelikelytoholdsomeponentsdisturbingAl(NO3)3colorimtricmethod.AlCl3colorimetricmethodissuperiortoUVspectrophotometricm

5、ethodandAl(NO3)3colorimetricmethod.ThetethodofextractionetricmethodandHPLC.Keyaniileaves;Totalflavonoids;Determinationmethod;Qualityidentification尤曼桉Eucalyptusyoumanii属桃金娘科桉属单蒴盖亚属肾药组树木，四川省林科院于1997年从澳大利亚引种获得成功。其叶片富含芦丁，此外还有桉树素等黄酮类物质［1］，有较大的药用和食用开发价值。本文研究了引种的尤曼桉叶总黄酮的测定方法和品质鉴别方法，旨

6、在为其开发利用提供参考。1材料与方法1.1仪器与试剂大连依利特高效液相色谱仪、EC2000色谱工作站；尤尼柯UV－2100分光光度计、索氏抽提器、真空泵、烘箱、控温水浴锅。无水乙醚、甲醇、三氯化铝、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠.freell甲醇在90℃抽提5～6h至无色为止，提取液转入100ml容量瓶中用甲醇定容制得样品液。1.3紫外分光光度法、三氯化铝比色法、硝酸铝比色法和高效液相色谱法测定尤曼桉叶总黄酮［2～5］1.3.1芦丁标准液的配制将芦丁标准品在120℃烘2h除去芦丁所含的结晶水，准确称取芦丁标准品29.7mg溶于70ml微热甲醇中，转入1

7、00ml容量瓶在室温（18℃）下用甲醇定容制得浓度为0.297mg/ml的芦丁标准液。1.3.2高效液相色谱条件HyperODS2C18色谱柱，流动相为冰醋酸∶甲醇∶水=3∶49∶48，检测波长UV355nm,柱温30℃，流速0.8ml/min。1.3.34种方法的回归方程按文献［2～5］的方法进行。根据测定结果，得回归方程：Y364＝0.83076X＋0.00533r=0.9998（紫外分光光度法）Y432=0.61159X+0.00065r=0.9999（三氯化铝法）Y500=2.08650X+0.00525r=0.9998（硝酸铝法）Y=0.

8、0005946X+0.107r=0.9999（液相色谱法）从标准曲线可以看出，紫外分光光度法在0.1～1.0mg/ml的浓