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1、东南沿海海域海水细菌的分布?18?解放军预防医学杂志2008年2月第26卷第1期JPrevMedChinPLAFebruary2008Vo1.26No.1东南沿海海域海水细菌的分布韩善桥,虞积耀,姜涛,王大鹏(海军总医院海战伤救治研究中心,北京100037)摘要:目的了解我国东南沿海海域海水细菌的种类及分布情况,为防治海水细菌感染提供科学依据.方法用海水采样器采集海水,经增菌培养和细菌分离,进行细菌学鉴定.结果从160份海水中分离出细菌58种666株,其中弧菌科细菌339株(50.9%),肠杆菌科细菌120株(18.0%),非发酵菌97株(14.
2、6%),革兰阳性球菌69株(10.4%),革兰阳性杆菌41株(6.1%).结论东南沿海海域海水细菌种类多,分布广,主要是弧菌科细菌,肠杆菌科细菌,其中尤以弧菌科数量最多.本研究对于海战伤感染的救治具有一定的参考价值.关键词:东南沿海;海水;细菌;弧菌科;肠杆菌科中图分类号:R123,1文献标识码:A文章编号:1001—5248(2008)01—0018—04在现代海战中,战伤合并海水浸泡后,伤员的感染程度要比陆战伤感染更加严重.由于细菌的特殊性,海战伤继发感染的细菌种类,感染特点和程度均不同于陆战伤,因此,研究海洋细菌种类及分布特点,对于海战伤细
3、菌感染的救治具有重要的意义.羔于海洋细菌的研究,国外已有较多报道¨0J,国内一些微生物工作者对我国不同海域及口岸海水细菌做了许多研究工作j,但由于海洋细菌种类多,分布广,生物学特性复杂,人们对它的认识还远远不够.为此,我们于2001年4月～2006年5月对我国东南沿海海域海水细菌的种类及分布情况进行调查,为防治该海域海水细菌感染提供科学依据,现将结果报告如下.1材料与方法1.1海水采集地点我国东南沿海海域,包括福建沿海港口,码头和海边40个采水点的海水,以及台湾海峡距福建沿海岸边约2.0nmile,从三都岛到东山岛40个采水点的海水.1.2海水采
4、集方法用海水采样器采集水面下30～100cm深处的海水,每个采水点取海水2份,每份500mL,共160份海水.海水采集后当13接种增菌培养基基金项目:全军医药卫生科研基金项目课题(No.06D004)作者简介:韩善桥(1963一),男,大本,副主任技师.从事细菌学研究.1.3海水采样器由国家海洋局天津海洋技术研究所生产.1.4培养基和试剂1.4.1增菌培养基碱性蛋白胨水,嗜盐菌增菌液,RVS肉汤,营养肉汤和厌氧菌增菌液(法国生物梅里埃公司产品),GiolittiCantont肉汤(英国OXOID公司产品),双相血培养瓶(郑州贝瑞特生物技术公司).
5、1.4.2分离培养基TCBS平板,血平板,麦康凯平板和Baird—Parker平板(英国OXOID公司产品).中国兰平板和SS平板(中国药品生物制品检定所和天津金章医用新技术研究所产品).1.4.3生化反应试剂英国OXOID公司和中国药品生物制品检定所产品.1.5仪器VITEK2全自动微生物鉴定仪,GNI和GPI鉴定卡,法国生物梅里埃公司产品.1.6方法1.6.1海水细菌分离(1)采用无菌手续取海水225mL,加入25mL碱性蛋白胨水中,35℃,将增菌培养6～8h,取表面培养物接种TCBS平板,35℃,培养18～24h,观察菌落特征,按弧菌科进行
6、细菌鉴定.(2)取海水225mL,加入嗜盐菌增菌液25mL中,35℃,增菌培养12～18h,取表面培养物接种于TCBs平板,35℃,培养18～24h,观察菌落特征,按弧菌科进行细菌鉴定.(3)取海水225mL,加入RVS增菌液25mL中,35℃,增菌培养18～24h,取培养物接种SS平板和中国兰平板,35℃,培养18～24h,解放军预防医学杂志2008年2月第26卷第1期JPreyMedChinPLAFebruary2008Vo1.26No.1?19?观察菌落特征,按肠杆菌科进行细菌鉴定.(4)取海水225mL,加入营养肉汤25mL中,35℃,增
7、菌培养12～18h,取培养物接种于血平板,中国兰平板和麦康凯平板,35℃,培养18—24h,观察菌落特征,按弧菌科,肠杆菌科,非发酵菌,葡萄球菌和革兰阳性杆菌进行细菌鉴定.(5)取海水1mL,加入19mLGiolittiCantoni肉汤中,以石蜡密封,35℃,增菌培养48h,再取培养物接种Baird—Parker琼脂,35℃,培养24～48h,观察菌落特征,按葡萄球菌进行细菌鉴定.1.6.2细菌鉴定取分纯平板菌落涂片染色,根据染色结果,按照文献[8—9]进行手工鉴定及全自动微生物仪鉴定.2结果2.1海水中弧菌科细菌检出结果分离出弧菌科细菌339
8、株,弧菌分离数量位居细菌总数首位,主要以溶藻弧菌,副溶血弧菌和沙鱼弧菌为主,而拟态弧菌和类志贺邻单胞菌分离数量较少(表1).2.2海水中
