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《mhcⅰ类分子-抗原肽单链三聚体的制备及其应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、MHCⅠ类分子-抗原肽单链三聚体的制备及其应用国际肿瘤学杂志2006年12月第33卷第12期JIntOncol,December2006.Vol33,No.12MHCI类分子一抗原肽单链三聚体的制备及其应用刘琴综述潘建平审校【摘要】主要组织相容性复合物(MHC)I类分子一抗原肽单链三聚体(SCT)由MHCI类分子的重链,B:微球蛋白及抗原肽分子用接头相连接折叠形成.SCT能有效地维持其共价结构,并稳定地在细胞表面表达,能更有效地激活抗原特异性的CD8细胞毒性T淋巴细胞,从而能更有效地清除病原体感染和恶性肿瘤细胞.
2、【关键词】基因,MHCI类;肿瘤;疫苗,DNA;免疫疗法【中图分类号】R730.51【文献标识码】A【文章编号】1673—422X(2006)12—0897—03PreparationofMHCclassI?antigenicpeptldesingle—chaintrimeranditsapplicationinimmuno-therapyforcancersLIUQInstituteofImmunology,ZhejiangUnweni@,Hangzhou310031,China【Abstract】Majorh
3、istoc0mpat.bilitycomplex(MHC)classImolecules,antigenicpeptidesinglechaintrimer(SCT)consistsofanantingenicpeptide—spacer-B2microglobulin(B2m)一spacer—Hchain.Recently,itisdemonstratedthatSCTscanefficientlymaintaintheircovalentstructure,andtheyareunusuallystablea
4、tthecellsul'face.SCTcanefficientlyinducethegenerationofantigenicpeptide—specificCD8cytotoxicTlymphocyteresponse,thereforetheycanplayimportantrolesintheeradicationofinfec—tion,particularlyinviralinfectionandtumorcells.【Keywords】Genes,MHCclassI;Neoplasms;Vaccin
5、es,DNA;Immunotherapy抗原肽一主要组织相容性复合物(MHC)I类分子异三聚体是由MHC1分子的重链,B微球蛋白(BITI)及抗原肽分子形成的异三聚体结构,该结构的稳定性对T细胞免疫有十分重要的意义.只有抗原肽一MHCI类分子异三聚体在细胞表面稳定表达,才能有效地激活CD8细胞毒性T淋巴细胞(CTL),引起T细胞免疫.但如果此异三聚体组装失败,而堆积在内质网内,或受到某些因素的下调作用,就不能有效地引起T细胞免疫】.j.近年研究表明,用基因工程的方法可以制备由接头(1inker)相连的抗原肽,Bm
6、以及MHCI类分子链,折叠形成单链三聚体(single—chaintrimer,SCT).该结构能有效地维持自身的共价结构,稳定地在细胞表面表达,且能有效激活抗原特异性的CD8CTL,因此,SCT在抗病毒和抗肿瘤免疫治疗及其DNA疫苗的研制中具有十分重要的意义.1SCT的制备1.1SCT制备的策略基金项目:浙江省科技攻关重点项目(2005C23005)作者单位:310031杭州,浙江大学免疫学研究所?897??综述?已成功将游离Bm和MHCI类分子的链编码基因用寡核苷酸linker序列连接起来形成单链融合分子.游
7、离的BITI在维持p链天然构象,尤其是与抗原肽结合的稳定性上具有很大的作用.Cannon等用一条含有45个碱基的linker序列,构建了小鼠的MHCI基因(H2D)的胞外功能区与BITI的N端相连接形成的单链融合分子.其linker序列编码的连接肽富含甘氨酸和丝氨酸,从而不影响功能区的折叠.体外抗原肽结合实验表明,该融合蛋白大大提高了抗原肽结合能力.用带有D一B.m的载体质粒免疫小鼠,其表达产物能更好地与抗原肽结合,并更有效地引起抗原特异性的CD8CTL应答.在此研究基础上,有学者同时应用2个linker序列,分
8、别将编码抗原肽序列,MHCI类分子重链和B:ITI的cDNA连接成融合基因,使其表达产物折叠形成带有共价结合抗原肽的SCT结构.Yu等用这种方法将小鼠的MHCI类基因(H一2K)和编码卵清蛋白(OVA)抗原肽的DNA序列构建成编码OVA—B.m—KSCT的融合基因.其表达产物OVA—pITI-KSCT的结构从N端开始为OVA抗原肽片段,随后是国际肿瘤学杂志2006年12月
